主题：【讨论】—关于校准曲线的配制中的浓度梯度如何设置？

我们一般是考虑待测物的浓度范围，然后配置标准溶液做标准曲线，让待测物的浓度基本上位于标准曲线的中间

我们实验室也是以2倍的方法做的校准标准曲线啦。

原文由 iamliutingting 发表:
在平时工作中，一般是做5个点，最低点我们做的一般都是检出限，以后的点一般都是以2倍的关系增加，比如说，这种物质的检出限是50ppb，那做标准曲线就做50 100 200 500 1000 ，五个点，还考虑到配制时的方便操作，所以选择这样做。

比较同意这个做法，不过样品的浓度好像不能太高

原文由 xfgong 发表:
一般我基本按照等差数列来分配数据点,最高点和最低点一般在10倍,不能太高,然后呢,对于不同浓度段宁愿多做几条标准曲线.

从检出限开始．

各浓度点在线性范围内均匀分布,有时低浓度时点较密,高浓度时点较宽

原文由 hotdoglet 发表:
目前农残检测中一般都需要使用校准曲线进行定量分析，校准曲线是由一系列的标准配制成的，在线性范围内，利用浓度与峰面积等进行最小二乘法拟合得到的线性关系，从而对样品中的目标物进行定量。那么在线性范围内的各个浓度应该如何分布，才能使校准曲线更合理、得到的定量结果更加准确？希望大家多多的分享实际工作中的经验。

任何科学实践必须有科学理论的支撑。在这个意义上讲，经验有时候是一种误导。在寻求某个困扰自己的问题答案的时候，我提倡用理论

支撑的观点来表达自己和说服自己。任何的盲从和权威都是不可取的。标准曲线的做法问题也是如此。
1、标准曲线的本质。标准曲线是标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之间的函数关系。建立标准曲线的目的是推导待测物质的理化属性

。如果有不需要标准曲线的方法，比如绝对校正，我想大家都会高兴。
2、标准曲线的适用性。这是做标准曲线的重要前提，这个问题实际很简单，就是这样一个问题：我的样品的仪器响应能否用我们所建立的

标准曲线来推导其理化属性？答案建立在仪器响应的特异性和标准系列和样品的匹配性上面。一方面我们总是力求仪器的响应对于标准和

样品是一视同仁；同时我们也要求我的样本跟标准基体匹配。所以最好的标准是基体匹配标准，最好的标准曲线是工作曲线。这样，我们

也很好理解为什么大多数分析要求标准曲线和样品同批测定（除非经过实验，标准曲线的变化不大），同样的道理也可以理解为什么我们

在做大批量检测的时候要插入QC检验样本，以考察仪器的稳定性。即使在任何信息未知的情况下，我们还是要做我们的分析测试的（要不

，我们都失业了），因为大家都是用同样的方法做，要错大家一起错；同时也因为我们相信伴随科学的进步，我们所测试的结果的准确性

就越接近真理。
3、简单的标准曲线----单点校正。对于分析成本高的测试，单点校正是不得以的选择。现在应用最多的是色谱分析，很多国家标准或国际

标准都采用单点校正，实际是建立在色谱分析的高选择性上面：我们的空白一般都很小，我们的线性一般都很好。在有这么多验前概率的

支撑下，色谱分析中大量的单点校正不失为一个合理的选择。但单点校正要丢失很多的信息量，这个信息量就是不确定度。
4、标准曲线的点的分布。从不确定度理论推算样本的不确定度时，有二个重要的结论：一、标准曲线的重心点处，所查出来的样品不确定

度最小。二、标准的点数越多，样品的不确定度越小。基于这两个结论的标准曲线的做法应该是：在样品浓度的附近尽量的多布标准点。

点做多做少，点分布如何，影响的是标准曲线所查出来的样品的理化属性的不确定度。好的测量应该是不确定度小的测量，这在判断样品

的结果是否超标或符合限值的时候至关重要。
关于标准曲线的其他问题，参见我的帖子：
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20080317/1191805/

各浓度点在线性范围内均匀分布；最好点数为奇数。

梯度分布就可以，成倍数关系，由低到高0.01，0.05，0.1，0.2，0.4.0.8，还得看看校正因子在什么范围以内，一般在0.999X，3个9就行！

原文由 calfstone 发表:2、标准曲线的适用性。这是做标准曲线的重要前提，这个问题实际很简单，就是这样一个问题：我的样品的仪器响应能否用我们所建立的标准曲线来推导其理化属性？答案建立在仪器响应的特异性和标准系列和样品的匹配性上面。一方面我们总是力求仪器的响应对于标准和样品是一视同仁；同时我们也要求我的样本跟标准基体匹配。所以最好的标准是基体匹配标准，最好的标准曲线是工作曲线。这样，我们也很好理解为什么大多数分析要求标准曲线和样品同批测定（除非经过实验，标准曲线的变化不大），同样的道理也可以理解为什么我们在做大批量检测的时候要插入QC检验样本，以考察仪器的稳定性。即使在任何信息未知的情况下，我们还是要做我们的分析测试的（要不，我们都失业了），因为大家都是用同样的方法做，要错大家一起错；同时也因为我们相信伴随科学的进步，我们所测试的结果的准确性就越接近真理。

感谢您的详细解答，其实在农残分析中也很提倡用标准基质来建立工作曲线，但是这个主要是考虑到空白标准基质对于某些目标物来说是比较难以找到。所以一般的方法都是用的标准溶液建立校准曲线。
还有一个问题就是有时候样品的成分很不相同，如有机质含量高低相差很大，这时需要匹配基质也很困难。

主要是根据测试项目浓度而定，基于倍数而取点。而实际测试当中也有很多不确定度。消除这方面也很重要。