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紫外可见分光光度计（UV）

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主题：【每周一问】紫外／可见光谱仪为何有浓度上的限制？？？

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hanya104

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发表于：2008/05/30 14:46:57 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

修改成简体的：如题，紫外／可见光谱仪为何有浓度上的限制？？？
如果从Beer’s Law:A=㏒(I｡／I)=εcl的角度应该怎样来解释呢？
还有补充问一下﹐在紫外/可见光谱仪图谱的纵坐标A为什么会设在3以下？是不是和上面的问题有关？

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2008/5/30 17:42:36 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

太浓了就不透亮了。回答完毕。

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hnytgcy

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2008/5/30 18:20:28 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

太浓了，还能满足线性关系吗？偏差增大了吧

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庐山居士

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2008/5/30 20:44:01 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 hanya104 发表:
修改成简体的：如题，紫外／可见光谱仪为何有浓度上的限制？？？

一、因为紫外有一个动态线性范围的限制，如果超出线性范围的上下限，那么仪器的响应值就与被测样品定量之间呈非线性关系。
二、试样的浓度过大，会使吸光度太大，因为杂散光的原因，分析测试结果会严重偏离比耳定律，使得分析误差增大。

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cjhck

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2008/5/31 17:15:18 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

吸收度在0.3-0.7范围内比较好，呈一定线性

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liu999999

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2008/5/31 17:17:08 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 shixiangqun 发表:
原文由 hanya104 发表:
修改成简体的：如题，紫外／可见光谱仪为何有浓度上的限制？？？

一、因为紫外有一个动态线性范围的限制，如果超出线性范围的上下限，那么仪器的响应值就与被测样品定量之间呈非线性关系。
二、试样的浓度过大，会使吸光度太大，因为杂散光的原因，分析测试结果会严重偏离比耳定律，使得分析误差增大。

分析很透切，同意该观点。

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savedown

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2008/5/31 20:49:03 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 liu999999 发表:
原文由 shixiangqun 发表:
原文由 hanya104 发表:
修改成简体的：如题，紫外／可见光谱仪为何有浓度上的限制？？？

一、因为紫外有一个动态线性范围的限制，如果超出线性范围的上下限，那么仪器的响应值就与被测样品定量之间呈非线性关系。
二、试样的浓度过大，会使吸光度太大，因为杂散光的原因，分析测试结果会严重偏离比耳定律，使得分析误差增大。

分析很透切，同意该观点。

回答不完全。

吸光度曲线是一条S形曲线，在浓段和稀段回归直线的斜率明显小于中间段，而且非线性度要大于中间段，一般认为0.3~0.7，也有认为到0.8的属于中间段，用线性回归可以取得较好效果，也就是比尔定律。或浓或稀由于斜率小，加之非线性特征较大，用比尔定律就有较大的误差，但如果缩小拟合区间线性还是可以满足的，只是由于斜率较小，敏感性就较差，故而建议尽量不采用。

一般光度计的A的上限是3，换句话说就是千分之一的光透过，如果A达到4，那么万分之一的光透过，这对仪器是非常具有挑战性的，只有少量的几家可以达到，比方PE的Lambda900就可以达到6，这的确是非常惊人的性能！这其中的关键就是杂散光控制。因此说贵有贵的理由。

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