主题：【讨论】在质谱中响应低或无响应的原因

对氯苯酚响应低的分析：
（1）仪器故障－不是，因为其他一切正常，只是在这出现问题
（2）样品前处理问题－采用流动注射方式，浓度选择也合适
（3）离子化方式－ESI/APCI均试过，理论上应ESI(－)最适合
（4）其他？


补充：
无信号诊断步骤
● 在需要工程师到达之前，首先说明出现此现象的时机，是正在工作时突然出
现，还是一段时间没用仪器，开机后出现的，在此之前，动了仪器哪些部位，
是某些扫描方式没有信号还是都没有信号。
● 例如MRM无信号，先看Q1,Q3有无，若Q1,Q3有，则通常是Analyst参数设置
问题，若无，则继续
● 看有无本底信号，电噪声有无,如有,则可能是离子源或软件问题。
● 检查真空,Q1 SCAN方式,通常应该0.7-1.2x10-5 torr之间,过好可能是Orifice堵塞,
过差则可能是漏气或真空泵有问题。
● 电源电压是否超限，UPS显示正常否？
● 更换了离子源以后，高压线是否插好到位？喷雾电压设置正确与否?
● 各路气体压力是否正常，阀门是否打开，加热气开了吗？
● 离子源喷雾针重装后，有无漏气，漏液？液体是否从针外壁流出？
● 管路有否堵塞，一节一节拆开测试，看通否，喷雾是否均匀，泵
压是否过高，通常不接色谱柱，200ul/min流速，压力应不超过数
十PSI。
进样管及spray tube堵塞：
a. 用Syringe推：直线喷出——没有堵塞
b. 若堵，取下用50水/50甲醇超声清洗
c. 超声仍无效,更换进样管及spray tube
Orifice堵塞：
现象：灵敏度下降或真空度异常的好
处理方法： a. 50水/50甲醇清洗orifice外部
b. 不能解决问题时再清洗orifice内部
● 若为APCI,检查流速是否过低（如没接LC，只用注射泵），放电
尖端对正方向没有，放电电流是否加上?
● 若为APPI,有没有通甲苯？
● 若为NANOSPRAY,针尖碰断了没有?高压放电烧坏或样品堵塞针
尖,外涂金属层被磨掉,加不上高压,需提高喷雾电压才有信号，都
要更换新的喷雾针。
● 有无气泡，注射针里面，LC流动相管路是否有空气，流速低时多
等一会儿，可手推一下注射针，帮助液体快速到达喷雾针。
● 诊断软件的使用要在工程师指导下进行，一定要OFF LINE
● 在工程师指导下用万用表测量各点电压值，判断故障点。
灵敏度低
● 首先按照无信号处理方法检查。
● Orifice 脏也可引起真空变差，当Curtain Gas很高才好，说明脏
了，清洗。
● 机械泵油半年以上没换，或颜色加深，-换油，低于刻度下限，-
补充，注意要用同型号的油。
● 管路漏液，样品没有完全进到离子源里。
● 管路部分堵塞，喷雾时断时续。
● 先调出安装仪器时的PPG等方法，用注射泵SYRINGE PUMP，
进PPG看看，CAL漂移否， 若CAL不对，造成质量数无法选
准，-重新校准仪器。
● 若注射泵采集标准品正常，则再看样品，然后用Reserpine等标
准品，接通LC，如果有手动进样阀，可从此处进样，看FIA有无
峰，若无，则可能是LC及源参数设置问题。
● 如果正常，则排除MS，再自动进样，看FIA有无峰，若无，则可
能是自动进样器问题。
● 若FIA正常，则再继续接上色谱柱采样，判断是色谱柱问题还是
流动相问题。
● 离子化方式是否对路，如非极性物质用ESI效果很差，有机酸采
用正离子方式没什么信号。
● 样品本身的问题，如样品没有完全溶解，浓度不够，所用溶剂与
流动相不匹配等。
● 样品存贮时间过长，保存条件不好，分解或吸附了。
● 放在自动进样器中的样品小瓶内套管底部有气泡，没取到样品，
或针头位置太高，而样品液面太低。
● 前处理步骤中，标准品、内标样品是否加进，提取过程中有无遗
洒。
● 离子抑制，-改变前处理方法或LC梯度，或换为APCI也可以降低
部分离子抑制效应。
● 离子对质量数输入准确否，有无错误？

电子轰击的离化效率本来就没有ＥＳＩ那么高效，产生的离子也没有ＥＳＩ那么稳定，四极杆可能很难扑捉目标离子，经过三重四级这么多过滤后，目标离子所甚无几，相对来说，离子越碎，受到系统或样品中的其他离子干扰将越严重．不同离子，相同的量对于检测器所能产生的强度应该是不一样的．

质谱的响应很大程度上取决于所生成离子的稳定性，因此根据对氯苯酚的结构，ESI正离子化由于Cl这个吸电子基的存在显然是不稳定的，仿佛负离子条件下由于Cl的存在稳定了负电荷，但是事实上并非这么简单，酚类弱酸的性质并不会由于加上几个基团而得到很大程度的改变（任何一本有机书上都有数据，pKa），尤其是Cl在吸电子基团中也并不算太强，因此其解离性不好是很正常的。

没理解阁下的意思！

突然想起来，多氯苯酚在质谱的响应值都蛮低的。

质谱响应不好主要还是待测物本身，仪器方面的一般我们也解决不来

原文由 speleers 发表:
质谱的响应很大程度上取决于所生成离子的稳定性，因此根据对氯苯酚的结构，ESI正离子化由于Cl这个吸电子基的存在显然是不稳定的，仿佛负离子条件下由于Cl的存在稳定了负电荷，但是事实上并非这么简单，酚类弱酸的性质并不会由于加上几个基团而得到很大程度的改变（任何一本有机书上都有数据，pKa），尤其是Cl在吸电子基团中也并不算太强，因此其解离性不好是很正常的。

分析透彻，有一定理论深度！高手！

原文由 speleers 发表:
质谱的响应很大程度上取决于所生成离子的稳定性，因此根据对氯苯酚的结构，ESI正离子化由于Cl这个吸电子基的存在显然是不稳定的，仿佛负离子条件下由于Cl的存在稳定了负电荷，但是事实上并非这么简单，酚类弱酸的性质并不会由于加上几个基团而得到很大程度的改变（任何一本有机书上都有数据，pKa），尤其是Cl在吸电子基团中也并不算太强，因此其解离性不好是很正常的。

待分析物解离情况不好，是可以通过改变pH值等方式改变解离情况：
ESI过程是将离子从溶液中转移至气相的过程，使待测组分在溶液中成为离子状态，可以提高生成气相离子效率以提高检测灵敏度。当待测组分为碱性物质时，可以选择加乙酸或甲酸使溶液pH ≈ pKa－2，使待测组分在溶液中形成正离子，采用正离子检测方式；当待测组分为酸性物质时，可以选择加氨水使溶液pH ≈ pKa＋2，使待测组分在溶液中形成负离子，采用负离子检测方式；

因此，也可以通过调节pH值，使对氯苯酚成为中性分子，采用APCI(-)方式离子化。当然这只是理论上的猜想，应根据实验结果判断离子化方式。

原文由 sunluning0521 发表:
对氯苯酚响应低的分析：
（1）仪器故障－不是，因为其他一切正常，只是在这出现问题
（2）样品前处理问题－采用流动注射方式，浓度选择也合适
（3）离子化方式－ESI/APCI均试过，理论上应ESI(－)最适合
（4）其他？


补充：
无信号诊断步骤
● 在需要工程师到达之前，首先说明出现此现象的时机，是正在工作时突然出
现，还是一段时间没用仪器，开机后出现的，在此之前，动了仪器哪些部位，
是某些扫描方式没有信号还是都没有信号。
● 例如MRM无信号，先看Q1,Q3有无，若Q1,Q3有，则通常是Analyst参数设置
问题，若无，则继续
● 看有无本底信号，电噪声有无,如有,则可能是离子源或软件问题。
● 检查真空,Q1 SCAN方式,通常应该0.7-1.2x10-5 torr之间,过好可能是Orifice堵塞,
过差则可能是漏气或真空泵有问题。
● 电源电压是否超限，UPS显示正常否？
● 更换了离子源以后，高压线是否插好到位？喷雾电压设置正确与否?
● 各路气体压力是否正常，阀门是否打开，加热气开了吗？
● 离子源喷雾针重装后，有无漏气，漏液？液体是否从针外壁流出？
● 管路有否堵塞，一节一节拆开测试，看通否，喷雾是否均匀，泵
压是否过高，通常不接色谱柱，200ul/min流速，压力应不超过数
十PSI。
进样管及spray tube堵塞：
a. 用Syringe推：直线喷出——没有堵塞
b. 若堵，取下用50水/50甲醇超声清洗
c. 超声仍无效,更换进样管及spray tube
Orifice堵塞：
现象：灵敏度下降或真空度异常的好
处理方法： a. 50水/50甲醇清洗orifice外部
b. 不能解决问题时再清洗orifice内部
● 若为APCI,检查流速是否过低（如没接LC，只用注射泵），放电
尖端对正方向没有，放电电流是否加上?
● 若为APPI,有没有通甲苯？
● 若为NANOSPRAY,针尖碰断了没有?高压放电烧坏或样品堵塞针
尖,外涂金属层被磨掉,加不上高压,需提高喷雾电压才有信号，都
要更换新的喷雾针。
● 有无气泡，注射针里面，LC流动相管路是否有空气，流速低时多
等一会儿，可手推一下注射针，帮助液体快速到达喷雾针。
● 诊断软件的使用要在工程师指导下进行，一定要OFF LINE
● 在工程师指导下用万用表测量各点电压值，判断故障点。
灵敏度低
● 首先按照无信号处理方法检查。
● Orifice 脏也可引起真空变差，当Curtain Gas很高才好，说明脏
了，清洗。
● 机械泵油半年以上没换，或颜色加深，-换油，低于刻度下限，-
补充，注意要用同型号的油。
● 管路漏液，样品没有完全进到离子源里。
● 管路部分堵塞，喷雾时断时续。
● 先调出安装仪器时的PPG等方法，用注射泵SYRINGE PUMP，
进PPG看看，CAL漂移否， 若CAL不对，造成质量数无法选
准，-重新校准仪器。
● 若注射泵采集标准品正常，则再看样品，然后用Reserpine等标
准品，接通LC，如果有手动进样阀，可从此处进样，看FIA有无
峰，若无，则可能是LC及源参数设置问题。
● 如果正常，则排除MS，再自动进样，看FIA有无峰，若无，则可
能是自动进样器问题。
● 若FIA正常，则再继续接上色谱柱采样，判断是色谱柱问题还是
流动相问题。
● 离子化方式是否对路，如非极性物质用ESI效果很差，有机酸采
用正离子方式没什么信号。
● 样品本身的问题，如样品没有完全溶解，浓度不够，所用溶剂与
流动相不匹配等。
● 样品存贮时间过长，保存条件不好，分解或吸附了。
● 放在自动进样器中的样品小瓶内套管底部有气泡，没取到样品，
或针头位置太高，而样品液面太低。
● 前处理步骤中，标准品、内标样品是否加进，提取过程中有无遗
洒。
● 离子抑制，-改变前处理方法或LC梯度，或换为APCI也可以降低
部分离子抑制效应。
● 离子对质量数输入准确否，有无错误？

这确实看不懂！