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主题：【求助】峰突然变得拖尾怎么回事？

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ichbinnasa
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发表于：2008/06/16 14:13:59 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的Akasil-C18柱，流动相是磷酸缓冲液含有30%的乙腈，以昨天用的时候还没什么问题，今天用同样的流动相，同样的样品峰就拖尾很严重了，请问各位高手这是什么原因？还有昨天用完的时候用纯水冲了柱子大约1小时，以前也冲的但是没那么长时间，是不是因为这样损坏了柱子？谢谢大家了。
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2008/6/16 14:16:35 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有一定的关系,最好加点有机相
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ichbinnasa
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2008/6/16 14:56:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢啊，那现在怎么办呢？还有得救吗？
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nnsss
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2008/6/16 15:52:18 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
把盐冲干净后，用纯有机相冲（条件允许的话小流速过夜）
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czx3000
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2008/6/16 16:50:53 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能是色谱柱塌陷，或者是色谱柱头污染，流动相中，加入三乙胺，再用90%乙腈水冲洗色谱柱，再用色谱纯的乙腈冲洗色谱柱二小时，流速一般控制在0.6-0.8ml/min.
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tengy1973
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2008/6/16 19:26:39 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 czx3000 发表:
可能是色谱柱塌陷，或者是色谱柱头污染，流动相中，加入三乙胺，再用90%乙腈水冲洗色谱柱，再用色谱纯的乙腈冲洗色谱柱二小时，流速一般控制在0.6-0.8ml/min.

这种方法是适用污染还是坍塌？
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ichbinnasa
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2008/6/17 10:22:18 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nnsss 发表:
把盐冲干净后，用纯有机相冲（条件允许的话小流速过夜）


谢谢大家了,请问用什么把盐冲干净呢?5%甲醇吗?
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ichbinnasa
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2008/6/17 10:23:36 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 czx3000 发表:
可能是色谱柱塌陷，或者是色谱柱头污染，流动相中，加入三乙胺，再用90%乙腈水冲洗色谱柱，再用色谱纯的乙腈冲洗色谱柱二小时，流速一般控制在0.6-0.8ml/min.


请问流动相中三乙胺的浓度是多少啊?
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shub-lily
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2008/6/18 16:51:42 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人觉得造成拖尾的原因是可能前一天用纯水冲柱子，并且时间过长，导致柱效下降。解决办法可以采用一些柱子再生的手段，譬如95%水+5%乙腈——THF——95%乙腈+5%水依次冲洗柱子试试。
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雪妖
czj_1027
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2008/6/18 17:32:52 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
C18的柱子以后用了盐、酸都不要用纯水，这样会引起C18链的顺意卷曲，用10%的有机甲醇从上30min，再换高一点有机溶剂冲。
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春天的楚楚
cyh3831
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2008/6/18 18:37:56 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 czj_1027 发表:
C18的柱子以后用了盐、酸都不要用纯水，这样会引起C18链的顺意卷曲，用10%的有机甲醇从上30min，再换高一点有机溶剂冲。

你拔一下信号线什么的看看,
要不在找一跟柱子换上去看看有没有问题
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