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主题：【求助】肾脏超微结构电镜观察咨询

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huquannihao
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发表于：2008/06/23 18:05:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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我们准备取大鼠肾皮质观察足细胞计数、足突平均宽度(FPW )及足突融合率、基底膜(GBM)平均厚度，参考资料方法如下(1)3500倍足细胞计数:每例观察3个肾小球,随机取10个视野,计数足细胞数。(2)8000倍FPW:测定裂孔膜水平上足突两侧膜间的距离,取其平均值。(3)8000倍足突融合率:首先量出基底膜总长度,设为X,然后量出基底膜上足突融合的总长度,设为Y,最后以Y /X,即得融合率。(4)8000倍GBM:以1 cm为单位,把基底膜分成若干个点,然后测定每点基底膜的厚度,再把各点基底膜的厚度相加设为X,计算其测定的点数设为Y,最后以X /Y,即得各组基底膜的平均厚度。
 
    我们因为对电镜没有经验，有几个问题麻烦指点：
    1、3500倍电镜下观察3个肾小球,随机取10个视野,计数足细胞数，这个方法可行吗？这个方法需要多少张照片？
    2、3500倍下每个视野大概能观测到几个肾小球？ 随机取十个视野怎么计算出每个肾小球足细胞数？
   
  3、8000倍下可以使用医学统计软件计算出足突平均宽度(FPW )及足突融合率、基底膜(GBM)平均厚度吗？
  多谢各位，急盼回复！
推荐答案：zhouzb回复于2008/06/28



你的问题有点意思。3500倍下一个视野应该说只能观察到几分之一个肾小球。给我email吧，我给你一个电话，你打电话咨询。
补充答案：

fftao812回复于2008/07/01

把你的问题发给川大华西电镜室杨老师，g-yang@163.com,他做肾组织样品很有经验。

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drizzlemiao
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2008/6/25 0:20:19 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个实在冷门。基本帮不上忙。不过，楼主应该是做过不少生物方面的光学显微观察的吧？电镜观察和光学观察的统计方法应该是类似的。所以我觉得楼主的问题其实跟电镜本身没太大关系。可能制样反而是个麻烦，如果要看的东西太大的话，电子束穿不透，那就看不到了，需要切片。样品可能还要冷冻。
再确认一下，楼主确定是用TEM而不是SEM观察？文献里应该有叙述实验细节的段落吧，你贴出来大家看看都用的什么设备，制样手段，数据采集方法，甚至照片，可能就会有些想法。我对生物显微相当外行，哪位有经验的，给点建议呀
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zhouzb
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2008/6/28 19:56:13 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 huquannihao 发表:
我们准备取大鼠肾皮质观察足细胞计数、足突平均宽度(FPW )及足突融合率、基底膜(GBM)平均厚度，参考资料方法如下(1)3500倍足细胞计数:每例观察3个肾小球,随机取10个视野,计数足细胞数。(2)8000倍FPW:测定裂孔膜水平上足突两侧膜间的距离,取其平均值。(3)8000倍足突融合率:首先量出基底膜总长度,设为X,然后量出基底膜上足突融合的总长度,设为Y,最后以Y /X,即得融合率。(4)8000倍GBM:以1 cm为单位,把基底膜分成若干个点,然后测定每点基底膜的厚度,再把各点基底膜的厚度相加设为X,计算其测定的点数设为Y,最后以X /Y,即得各组基底膜的平均厚度。
 
    我们因为对电镜没有经验，有几个问题麻烦指点：
    1、3500倍电镜下观察3个肾小球,随机取10个视野,计数足细胞数，这个方法可行吗？这个方法需要多少张照片？
    2、3500倍下每个视野大概能观测到几个肾小球？ 随机取十个视野怎么计算出每个肾小球足细胞数？
   
  3、8000倍下可以使用医学统计软件计算出足突平均宽度(FPW )及足突融合率、基底膜(GBM)平均厚度吗？
  多谢各位，急盼回复！



你的问题有点意思。3500倍下一个视野应该说只能观察到几分之一个肾小球。给我email吧，我给你一个电话，你打电话咨询。
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fftao812
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2008/7/1 21:18:34 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
把你的问题发给川大华西电镜室杨老师，g-yang@163.com,他做肾组织样品很有经验。
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