主题:【原创】用HILIC柱遇到的问题

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happy_horse1126
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疯了。。。怎么这么多人不懂装懂啊

HILIC柱的保留时间变化和C18有区别,保留曲线是钟型曲线,就是类似正态分布那样的曲线。常规的C18是有机相增大保留时间缩短,但HILIC柱在60%有机相左右会有一个拐点,就是有机相比例增高,保留时间延长。具体的拐点位置和生产厂商的填料有关,一般是在50%-60%有机相之间。

其实亲水色谱填料设计的初衷是为质谱设计的,目的就是使极性化合物在高有机相的环境下有保留,所以你用HILIC柱时水相超过60%是没有意义的。
soybean
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ACQUITY UPLCTM BEH HILIC色谱柱仅仅是用来分析和保留强极性碱的,酸性、中性或非极性化合物没有保留
对于分子量低于200道尔顿的强极性碱,ACQUITY UPLCTM BEH HILIC色谱柱的最佳流速范围是0.4~0.8ml/min
同Atlantis HILIC 硅胶基质的色谱柱相比,ACQUITY UPLCTM BEH HILIC色谱柱的保留要弱(梯度条件下保留约低20%,等度条件下保留约低35~65%),这是由于BEH颗粒的表面硅羟基浓度较低的原因
在HILIC的使用中,请注意水是洗脱能力最强的溶剂,因此样品溶液中必须尽可能避免含水
摸索条件建议使用一个梯度条件(从95%乙腈至50%乙腈的梯度),如果没有保留,则用95:3:2的乙腈:甲醇:水相缓冲液进行等度分析
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