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主题：【求助】如何提高分离度

浏览0 回复8 电梯直达
ninghan21222
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发表于：2008/07/03 11:02:14 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
采用C18柱检测6种有机酸，流动相为A：PH2.65 0.01M磷酸氢二钾 B：甲醇，A:B=95:5，但是其中的丙酮酸和苹果酸以及酮戊二酸都在3min左右出峰，出峰时间只相差0.1min左右，无法有效分离，试用了不同流速和不同流动相的PH(2.05、2.32、2.65）还是分离不了，请问用什么方法可以把它们分离开呢？
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2008/7/3 14:21:36 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
换柱效更高的柱子,或者换其他类型的柱子
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SuDaToKo
kikiboy
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2008/7/3 14:49:48 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
条件允许的话试试UPLC
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2008/7/3 15:03:47 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
供参考：
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍[/url]
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2008/7/3 15:03:47 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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zxhmily
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2008/7/4 10:56:04 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果柱效够高的话可以尝试降低流速.尝试用分级梯度.
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yuanhejun
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2008/7/4 11:00:05 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议调节PH，两个酸性物质，其PKa值大概是多少，然后确定适当的PH值。
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〓猪哥哥〓
03yx2
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2008/7/4 16:02:14 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zxhmily 发表:
如果柱效够高的话可以尝试降低流速.尝试用分级梯度.

降低流速应该没有多大的用处，还是先测测两酸的PKa值，看看改变流动相的PH值试试看。
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hyd528
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2008/7/5 21:55:44 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
试试调整合适PH，然后选用梯度洗脱看看
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