主题:【有奖征集】现代生命科学相关实验技术!

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dong3626
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刚刚来生命科学版上任,有很多还不是很熟悉,希望大家以后多多支持。

现有奖征集生命科学方面的技术,经典和最新的都可以。
介绍的内容包括原理,应用或者发展之类的。 如果是自己经常用的,欢迎将自己的经验分享(加大积分奖励哦。。呵呵。。。)!


之前在学校的时候学的是微生物,接触的微生物方面和分子方面的实验比较多,尤其是蛋白质和DNA方面的,有段时间不搞了,对这个方面不是太熟悉了,希望能够通过这个帖子,让大家都对生命科学方面的技术有所了解,同时也使自己不至忘掉老本行哈哈。。。
大家多多支持!!
推荐答案:huiyi-yu回复于2008/11/18
蛋白质纯化
 蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。

  是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有:

  1、沉淀,

  2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。

  3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

  4、层析:

  a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。 

  b.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出。

  5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开。
补充答案:

海啸回复于2008/11/19



不是很清楚,首先需要声明的是,杂交水稻的基因来源都是水稻有关的,
俺读小学和初中的时候,我们家乡就是杂交水稻育种的地方,我们那很多人都在做这个,我们这里是育种的最后一个环节,也就是说我们收获的就是杂交水稻的种子,说简单点就是将2种水稻,假设为A和B,首先这2种都是水稻,A优点是产量高,稻穗长,缺点是易遭虫害,易倒伏,B优点是生命力顽强,耐虫害,抗倒伏,缺点是产量低,稻穗短,且谷粒不饱满(因其不能自行授粉繁殖)。
育种的过程就是将这样的2种各有优缺点的水稻进行杂交授粉,将A的花粉通过人工的方法传播到B,从而使得B被授粉而结出稻穗,这样的稻穗作为种子进行种植后,其一代会表现处上述A和B的优点(显性基因),而去除了缺点(隐性基因),但是这样的种子种植一代后收获了稻谷接着作为种子,进行第二代种植的话,结果就会有1/4是具备上述A、B的优点,还有1/4是表现A的特征,1/4表现B的特征,然后1/4表现上述A、B的缺点,这样看来,杂交水稻只适合一代种植的,不能留种再种植的,这就是杂交水稻的种子为什么需要去购买的原因。
  杂交水稻有分类别,一种是属于转基因的,另一种不属于,所以您的问题是回答不了的,上述举例的是2系法杂交水稻,它不属于转基因的杂交水稻。

  转基因食品的概念  根据世界卫生组织的定义,转基因食品是指生物体里的基因被以非自然的方法加以改变,使基因由一个生物体移至另一个生物体或在两个没有关系的生物体之间转移
http://define.cnki.net/WebForms/WebDefines.aspx?searchword=%E8%BD%AC%E5%9F%BA%E5%9B%A0%E9%A3%9F%E5%93%81

活到九十 学到一百回复于2008/11/20

以前搜集的液相色谱测定蛋白质的几篇资料:

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱测定蛋白质及肽[/url]

戈壁明珠回复于2008/11/20

PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的
寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
  ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增
形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
  ②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引
物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
  ③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶
序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制
链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又
可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟, 2~3小时就能将待扩目的基因扩增放
大几百万倍。(Plateau)。 到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。

  PCR的反应动力学  PCR的三个反应步骤反复进行,使DNA扩增量呈指数上升。反应最终
的DNA 扩增量可用Y=(1+X)n计算。Y代表DNA片段扩增后的拷贝数,X表示平(Y)均每次的扩
增效率,n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%,但在实际反应中平均效率达不到理
论值。 反应初期,靶序列DNA片段的增加呈指数形式,随着PCR产物的逐渐积累,被扩增的D
NA 片段不再呈指数增加,而进入线性增长期或静止期, 即出现“停滞效应” ,这种效应称
平台期数、PCR 扩增效率及DNA聚合酶PCR的种类和活性及非特异性产物的竟争等因素。大多
数情况下,平台期的到来是不可避免的。


  PCR扩增产物  可分为长产物片段和短产物片段两部分。短产物片段的长度严格地限定
在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段。短产物片段和长产物片段是由于引物所结
合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应周期中, 以两条互补的DNA
为模板,引物是从3'端开始延伸, 其5'端是固定的,3' 端则没有固定的止点,长短不一,
这就是“长产物片段”。进入第二周期后,引物除与原始模板结合外,还要同新合成的链(即
“长产物片段”)结合。引物在与新链结时, 由于新链模板的5'端序列是固定的, 这就等于
这次延伸的片段3'端被固定了止点, 保证了新片段的起点和止点都限定于引物扩增序列以内
、形成长短一致的“短产物片段”。不难看出“短产物片段”是按指数倍数增加, 而“长产
物片段”则以算术倍数增加, 几乎可以忽略不计, 这使得PCR的反应产物不需要再纯化,就
能保证足够纯DNA片段供分析

It is me!回复于2008/11/24

看到有一个版友问杂交水稻是不是转基因水稻.

杂交水稻不是转基因水稻.

杂交水稻是不同品种水稻之间杂交,选择优良品种.
如同不同种属的狗之间交配,但仍然是狗与狗之间.

转基因的水稻,其基因已经不是来源于水稻,有可以来自玉米或者棉花中的某个优良特性基因.
已经不是同一种属之间的杂交了.如同狗已经不和狗交配了,可能是硬要求其与猫交配.

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Solutions Manual

William Fixsen, Harvard University, 0-7167-3282-3.The Solutions Manual contains worked-out answers to all the problems in the textbook.

Modern Genetic Analysis Web Site

W. H. Freeman with Sumanas, Inc. with contributions from William Sofer, The State University of New Jersey at Rutgers. This multimedia learning tool complements and enriches the textbook. All the features of the CD-ROM function within the context of the book's coverage. Practice tools such as interactive quizzes in every chapter help students review for exams. The Modern Genetic Analysis Web site, at www.whfreeman.com/genetics, will be updated regularly.

Modern Genetic Analysis 1.0 CD-ROM. (hybrid format for Windows and Macintosh)

Packaged with every copy of the textbook, the Modern Genetic Analysis 1.0 CD-ROM is the same as the Web site with these two additions: (1) original animations on topics such as transcription, DNA replication, and complementation bring the textbook figures to life; and (2) for instructors, the text's entire illustration program and the original animations are available in a Presentation Manager, which allows the preparation of a series of illustrations, animations, and videos for lecture. Source files for the illustrations are provided so that images can be exported into presentation software programs.

Instructor's Resource Manual and Test Bank

Sally Allen, University of Michigan, and Ewen Harrison. Printed: 0-7167-3422-2, Windows: 0-7167-3421-4, Macintosh: 0-7167-3420-6

The Instructor's Resource Manual contains over 700 test questions in multiple-choice, true-false, and matching formats. It also contains complete sample exams and teaching hints. Electronic versions of the test questions let professors edit and rearrange questions and add their own.

Transparency Set: 0-7167-3423-0

A full-color overhead transparency set of 130 key illustrations from the textbook is available free of charge to qualified adopters. The overhead transparency set also includes 100 transparency masters of text illustrations and tables.



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蛋白质纯化
 蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。

  是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有:

  1、沉淀,

  2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。

  3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

  4、层析:

  a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。 

  b.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出。

  5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开。
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这个网址,可以看到一些东西:http://www.lmbe.seu.edu.cn/biology/bess/biology/default.htm
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我最想知道我们的杂交水稻算不算是转基因食品。谁能解释一下?
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国家推行众多的条例,再三强调,以人为本
以人的生命安全放在第一,
多了解点生命科学的内容很不错,
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科学时报:写在人类基因组南方中心成立10周年之际:
http://www.sciencenet.cn/htmlnews/2008/11/213385.html
乐观科技功臣竟是无肾人:
http://news.sina.com.cn/s/2008-11-19/074814752189s.shtml
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平时经常听到生命科学这个词,具体不太了解,希望斑竹多多介绍。
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