主题：【分享】水产品质量安全检测样品前处理新技术及其发展趋势

9 衍生化

使用色谱分离原理检测化学成分，当被检测目标成分的理化性质（如沸点、极性、吸光性）不便分离检测时，经常采用衍生化技术，改变其理化性状，达到可以使用色谱仪检测的目的。

化学衍生法指借助化学反应将待测组份接上某种特定基团，从而改善其检测灵敏度和分离效果的方法。利用化学衍生反应达到改变化合物特性的目的，使其更适合于特定分析的过程，在仪器分析中被广泛应用。气相色谱中应用化学衍生反应是为了增加样品的挥发度或提高检测灵敏度，而高效液相色谱的化学衍生法是指在一定条件下利用某种试剂(通称化学衍生试剂或标记试剂)与样品组份进行化学反应，反应的产物有利于色谱检测或分离。一般化学衍生法主要有以下几个目的：提高样品检测的灵敏度；改善样品混合物的分离度；适合于进一步做结构鉴定，如质谱、红外或核磁共振等。进行化学衍生反应应该满足如下要求：对反应条件要求不苛刻，且能迅速、定量地进行；对样品中的某个组份只生成一种衍生物，反应副产物及过量的衍生试剂不于扰被测样品的分离和检测；化学衍生试剂方便易得，通用性好[37]。

衍生化常用的反应有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、硼烷化、环化和离子化等。虽然气相色谱已有许多衍生化方法，但它有一个致命的缺点是不能用于热不稳定化合物。此外，对于一些有复杂基质的实际样品，除分离上的困难外，还容易污染进样器和损坏柱子。

衍生化反应从是否形成共价键来说，可分为两种：标记和非标记反应。标记反应是在反应过程中，被分析物与标记试剂之间生成共价键；所有其它类型的反应，如形成离子对、光解、氧化还原、电化学反应等都是非标记反应。另一种区分衍生化反应是从衍生反应的场所来分，有柱前衍生化(pre-columnderivatization)，柱上衍生化(on-columnderivatization)和柱后衍生化(post-columnderivatization)三种。从是否与仪器联机的角度来分有：在线(on-line)、离线(off-1ine)和旁线(at-line)(自动化)三种。目前在HPLC中以离线的柱前衍生法(简称柱前衍生法)与在线的柱后衍生法(简称柱后衍生法)使用居多，旁线衍生化方法是发展方向。   

柱前衍生法和柱后衍生法各有其优缺点。柱前衍生法的优点是：相对自由地选择反应条件；不存在反应动力学的限制；衍生化的副产物可进行预处理以降低或消除其干扰；容易允许多步反应的进行；有较多的衍生化试剂可选择；不需要复杂的仪器设备。缺点是：形成的副产物可能对色谱分离造成较大困难；在衍生化过程中，容易引入杂质或干扰峰，或使样品损失。柱后衍生法的优点有：（1）形成副产物不重要，反应不需要完全，产物也不需要高的稳定性，只需要有好的重复性即可；（2）被分析物可以在其原有的形式下进行分离，容易选用已有的分析方法。缺点是：（1）对于一定的溶剂和有限的反应时间来说，目前只有有限的反应可供选择；（2）需要额外的设备，反应器可造成峰展宽，降低分辨率。

应用实例。（1）硅烷化柱前衍生气相色谱法测定氯霉素残留：样品经提取，浓缩净化、微氮吹干后，加入100μL硅烷化试剂，经60℃30min反应。氯霉素的沸点降至可供气相色谱或气质联用仪分析用。采用DB-35MS（30m×0.25mm×0.25µm）色谱柱。（2）氧化铅后柱衍生—HPLC法测定孔雀石绿残留：孔雀石绿（malachite green，MG）属于三苯甲烷类染料。无色的母体形式（leuco malachite green，LMG）是孔雀石绿在鱼体及其他生物体内的主要代谢产物和存在形式，在检测孔雀石绿在鱼体内的残留，应同时检测MG与LMG。采用C18柱色谱柱（250×4.6mm I.D.，5μm）和Celite 545氧化铅后柱（纯PbO2（1：1），20mm×2.1mm I.D）。结果在MG、LMG与结晶紫（GV）、母体结晶紫同时检测时，保留时间分别为：MG 8.33min、GV 14.18min、LMG 18.19min和19.84min。使用氧化铅后柱衍生—HPLC法测定孔雀石绿残留，具有分离效率高、快速、重现性好、仪器设备简单等优点，是MG、LMG检测中最常用的方法。

虽然已有许多的衍生化试剂被使用，但是目前开发新的衍生化试剂仍然是一个活跃的研究领域，其主要目的是不断提高灵敏度和选择性以及扩大应用范围。

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这是一篇论文？写的不错

你太有才啦！！！

这是一篇综述性的文章，类似的文章很多，楼主发表的，应该是早了，不知道发在何处
衍生只是检测的一部分，还有液相，液质这些检测器，楼主要是把这些介绍完了，文章就丰满了

比较全面，谢谢楼主了

不错的综述，没少花时间。谢谢楼主分享！

楼主是个人才啊，啥都会，关键还能挣积分，哈哈。希望你是实验室工作人员