主题：【求助】流动相用甲醇/乙睛各自特点

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在反相色谱中, 甲醇和乙腈是最常用的有机溶剂，二者性质的差异表现在LC性能上的区别。

（1）价格，乙腈高于甲醇
在分析成本上，HPLC级的乙腈，价格比HPLC级的甲醇高的多。因此，一般的LC分析有机试剂首选甲醇为多。但文献所示的条件多用乙腈。


（2）吸光度，乙腈低于甲醇
所谓的HPLC级是指除去具有吸收UV的物质, 在规定的吸收波长上的吸光度小于规格值, 但并不是指绝对的纯度高。从这四种试剂的吸收光谱看，HPLC级的乙腈吸收最小，尤其在低波长范围。因此在UV检测时，其产生的噪音最小，在低波长尤其明显。在UV低波长检测时，高灵敏度检测用HPLC级乙腈最合适。另外，在梯度分析用UV检测时，HPLC级乙腈产生的鬼峰最少，同时由于其低的吸收值，梯度变化使吸收值变化最小，较大范围内的反相有机试剂梯度用HPLC乙腈最适宜。

HPLC级和优级甲醇的吸收光谱相差不大，但优级不能保证低吸光度，因此还是尽量使用HPLC级甲醇。

 

（3）压力，乙腈低于甲醇



色谱柱的压力降同很多因素有关，包括柱长度、内径、填料颗粒大小、填料性质、流速、温度及流动相组成等。但在实际分析过程中，色谱柱确定后，影响压力变化的因素主要是流动相中有机溶剂和缓冲液混合比例的不同，甲醇与水混合后随着甲醇比例的增大压力先增高后降低，而乙腈以同样比例与水混合并不如此，乙腈明显优于甲醇。同时我们也看到温度对压力的影响，温度升高，压力下降。


（4）流动相脱气，乙腈要注意。这里只讨论预先混合的流动相配置问题。甲醇与水混合时会发热，温度升高，多余溶解的空气较易变为脱出气泡，容易脱气。而乙腈与水混合是吸热反应，随着温度慢慢回到室温，产生气泡，所以要考虑脱气。



（5）洗脱强度，一般而言，乙腈大于甲醇。乙腈和甲醇与水组成混合流动相，当二者比例相同时，一般情况下，乙腈的洗脱能力强，尤其是混合比例低时。相同的保留时间，乙腈的比率只需甲醇的一半都不到。另一方面，当有机溶剂100％或与此非常接近时，对于胡萝卜素和胆甾醇来看，甲醇的洗脱能力往往比乙腈强。

（6）分离选择性，有差异



乙腈和甲醇在分离选择性上有一定的差异，尤其是极性或离子化合物，出峰次序往往会不一致。这是由于有机溶剂的化学性质不同所致（甲醇是质子性，乙腈是非质子性）。因此，当用乙腈（甲醇）不能获得良好分离时可以试试甲醇（乙腈）。

 


（7）峰形，有时出现差异



对于像水杨酸等化合物，用乙腈时脱尾大，用甲醇则可抑制脱尾。这与硅胶表面性

质与目标化合物有相互作用，而流动相会影响这种作用。因有机溶剂分子的化学性质不同，或者对目标化合物溶解能力的差异就导致了拖尾情况的不同。



可是，一般情况下，聚合物基质的反相柱在使用甲醇时比硅胶柱更具有峰拖尾的倾向，特别是用聚苯乙稀-二乙烯苯柱分析芳香族化合物时常见，而用乙腈是效果要好的多。



（8）结论



总之，对于反相色谱中常用的乙腈和甲醇，一般情况下使用HPLC乙腈效果较好，但当用乙腈达不到效果时，可以试试HPLC级甲醇。

这个不错,天天看他们用,一下还真说不清楚,学习学习,谢谢!

谢谢  说的挺好的