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主题：【转帖】几种密度梯度离心剂的使用！

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平凡人
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发表于：2009/02/14 11:12:48 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一．蔗聚糖—泛影葡胺（Feicoll-Hypaque）溶液
1．蔗聚糖――泛影葡胺可使红细胞聚集成串后沉降，及粒细胞沉降，最多用于人外周血单细胞分离，常用400×g，15-30分钟，水平离心；
2．可用膜滤器除菌，也可用加热高压灭菌；
3．离心时保持20度效果较为重要，温度过高或过低均影响分离效果；
4．可用于人外周血、骨髓等分离单个核细胞、E花环、EA细胞分离、肿瘤细胞分离、TIL等分离及死细胞去除等。

二．Percoll分层溶液
1．Percoll可以制备成不同密度使用液，形成不连接密度，用于分离各种不同密度的细胞；也可用转角离心机2000×g转角离心（28度）1小时，产生S形连续梯度，其不同部位的密度可用不同密度的色珠指示，用于分层分离不同密度的细胞；
2．可高压灭菌，但压力过高可形成胶状，长期储备的原液有时会析出结晶，不影响其使用；
3．常用于人单核细胞、NK细胞、B淋巴细胞、小鼠低密度细胞、枯否氏细胞等分离。

三．Metrizamide
1．可用PBS配制不同密度，用于各种细胞分离；但浓度过高易引起细胞聚集。
2．常用于树突状细胞。
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2010/11/30 9:57:34 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
制备这个密度梯度的溶液，大家都怎么做？
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2011/8/21 13:20:18 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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