主题:【转帖】实验室必读——有毒物质注意事项!

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EB(Ethidium bromide,溴化乙锭)
溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的NDA条带。溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性!会在60-70度是蒸发(所以最好不要在胶太热的时候加,或者应该加到液体里,0.5ug/ml,染色半小时)(当EB加得过多时,也可以在室温用水将已染色的凝胶浸泡20min以降低未结合的EB引起的背景荧光)。

溴化乙锭EB净化和处理方法:
EB是我们从事生命科学尤其是分子生物学经常要接触的致癌性物质,且不好处理.现提供如下方法,供参考。
1 严禁随便丢弃。因为EB是强致癌性,而且易挥发,挥发至空气中,危害很大。
2 废 EB溶液的处理方法
(1) 对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下处理: 
a. 将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml; 
b. 加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4 ,混匀,再加入等量的25mol/L HCl,混匀,置室温数小时; 
c. 加入一倍体积的2.5mol/L NaOH,混匀并废弃。 
(2) EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理: 
a. 按1mg/ml的量加入活性炭,不时轻摇混匀,室温放置1小时; 
b. 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。
3 废EB接触物,如抹布,枪头。
一般回收至黑色的玻璃瓶中,定期进行焚烧处理。
由于EB是一种诱变剂,直接倒入水槽或扔进拉圾箱可能会带来危害,所以应该根据情况处理:
1. 电泳胶
胶里面痕量的EB没有问题,如果小于0.1%可以直接扔掉。而如果发红,即大于等于0.1%时应该放在生物危害柜中焚烧掉。
2. EB溶液
<10ug/ml 时可以直接倒入水槽
>10ug/ml 时应该用木炭过滤或化学方法使其失活(推荐用木炭过滤的方法)
溶液中还有重金属、氢化物、硫化物时应该按照危险垃圾处理
化学中和方法:
方法一:加等体积的漂白粉,搅拌4小时,静置4天,用NaOH调至pH4-9, 倒入排水沟的同时用大量水冲。
方法二:每100ml加5%磷酸,加12ml0.5M的NaNO3,搅拌并静置20小时,同上调pH, 倾倒。
3. 手套、设备等物品
放在医用垃圾中焚烧,如污染严重则用漂白剂处理。
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DEPC(diethylprocarbonate焦碳酸二乙酯) 
闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂, 可灭活各种蛋白质,是RNA酶的强抑制剂。而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,并避免接触皮肤。内压可导致溅泼.操作时戴合适的手套,穿工作服,并在化学通风橱里进行DEPC毒性并不是很强,但吸入的毒性是最强的,使用时戴口罩。不小心占到手上注意立即冲洗。

丙烯酰胺
属中等毒性物质。可通过皮肤吸收及呼吸道进入人体,因此,在搬运和使用中必须穿戴好防护用具,如防毒服,防毒口罩及防毒手套等。丙烯酰胺的危害主要是引起神经毒性,同时还有生殖、发育毒性。神经毒性作用表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化,试验还显示丙烯酰胺是一种可能致癌物,职业接触人群的流行病学观察表明,长期低剂量接触丙烯酰胺会出现嗜睡、情绪和记忆改变、幻觉和震颤等症状,伴随末梢神经病如手套样感觉、出汗和肌肉无力。累积毒性,不容易排毒。
具备以下任何一项者,可列为慢性丙烯酰胺中毒观察对象:
a.接触丙烯酰胺的局部皮肤出现多汗、湿冷、脱皮、红斑;
b.出现肢端麻木、刺痛、下肢乏力、嗜睡等症状;
c.神经-肌电图显示有可疑神经源性损害。

治疗原则
可用B族维生素、能量合剂,并辅以体疗、理疗及对症治疗。重度中毒者应同时加强支持疗法。
NN-亚甲双丙烯酰胺
神经毒剂,影响中枢神经系统,切勿吸入粉末,效应累积。
beta-巯基乙醇
可致命,对呼吸道、皮肤和眼睛有伤害。
乙腈
易挥发易燃,是一种刺激物和化学窒息剂,通风橱中远离热、火。
乙酸(浓的)
可能因为吸入或皮肤吸收而受到伤害,要戴手套和护目镜,最好在化学通风橱中操作。
DTT
很强的还原剂,散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体或高浓度储存液时,戴手套和护目镜,在通风橱中操作。
过硫酸酸铵
对粘膜和上呼吸道、眼睛和皮肤又较大危害性,吸入可致命。操作时戴手套、护目镜。始终在通风橱中操作。
TEMED
强神经毒性,防止误吸,操作时快速,存放时密封。
氯仿(CHCl3)
对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用。它是一种致癌剂,可损害肝和肾。它也易挥发,避免吸入挥发的气体。操作时戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。
甲醛(HCOH)
有很大的毒性并易挥发,也是一种致癌剂。很容易通过皮肤吸收,对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。避免吸入其挥发的汽雾。要戴合适的手套和安全眼镜。始终在化学通风橱内进行操作。远离热、火花及明火。
十二烷基硫酸钠(SDS)
有毒,是一种刺激物,并造成对眼睛的严重损伤的危险。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。
Trizol
含有毒物质苯酚,对眼睛有刺激性,腐蚀皮肤。如皮肤接触Trizol。请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。如果只是少量接触,并处理后症状减轻,估计问题就不大。 
紫外光或紫外线
可损伤眼视网膜。切勿用裸眼和没有防护装置的紫外光源。在实验室里常用的紫外光源包括手提式紫外灯和紫外透射仪。只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。紫外线也是诱变剂和致癌的。为使暴露减少到最低限度,确保紫外光源要采用适当防护装置。在紫外光下操作时要戴合适的预防性手套。
还要注意酒精灯的使用!小心着火!注意,不要把酒精灯灌的超过2/3满。
在沙漠里哭泣的鱼
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老是有种感觉,就是这些东西我们平常都接触不到,所以疏忽了,其实有时候看看那些化学物质的简称或者通俗名有好多都是我们平时用到的,一不小心就出事了,所以不管做什么事安全第一,生命是一切的本钱...
zhxq1970
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