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液质联用（LCMS）

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主题：【已应助】【求助】提取回收率怎么会高呢？

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xiaohualuck

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发表于：2009/04/24 16:02:54 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我先在正在摸一个固相萃取柱提取回收率的方法，怎么处理完了的样品比标准还要高一倍，方法具体如下：1ml甲醇活化小柱、1ml水冲洗、上样（5ul标准溶液+500ul空白血）、抽干后1ml水冲洗、抽干、1ml甲醇冲洗并收集流出液体、N2气吹干、100ul 10%甲醇复溶后离心，取上清液进样。对照是5ul样品直接加入10%甲醇100ul。
我用的是液质连用，刚开始做，出这种问题觉得很奇怪，希望高手予以指导，谢谢！

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2009/4/24 16:41:33 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaohualuck 发表:
我先在正在摸一个固相萃取柱提取回收率的方法，怎么处理完了的样品比标准还要高一倍，方法具体如下：1ml甲醇活化小柱、1ml水冲洗、上样（5ul标准溶液+500ul空白血）、抽干后1ml水冲洗、抽干、1ml甲醇冲洗并收集流出液体、N2气吹干、100ul 10%甲醇复溶后离心，取上清液进样。对照是5ul样品直接加入10%甲醇100ul。
我用的是液质连用，刚开始做，出这种问题觉得很奇怪，希望高手予以指导，谢谢！

用空白基质加标比较一下，说不定对你的这个药有基质增强效应。

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雾非雾

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2009/4/24 20:33:11 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

血做基底非常复杂，恐怕SPE柱不一定能净化得那么彻底的。要加强净化手段才行。

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风之彩

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2009/4/25 11:40:15 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你做空白对照了没有？空白有没有干扰呢？
还有做质谱的提取回收率，应该要考虑到基质效应。所以你的方法不太正确。
你应该用空白血浆按你的样品处理那样过柱吹干后，加入含5uL标准溶液的100uL 10％的甲醇溶液来和你的样品比，这才是回收率。
基质效应是空白血浆按你的样品处理那样过柱吹干后，加入含5uL标准溶液的100uL 10％的甲醇溶液振荡后和含5uL标准溶液的100uL 10％的甲醇溶液比。
如果有基质增强效应，那么会出现你所说的情况的。

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