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主题：【求助】衍生化后GC/MS检测不到氨基酸

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sysun2005
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发表于：2009/06/02 11:55:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
遇到一个很怪的实验结果。测定细菌细胞内氨基酸和有机酸的含量，细胞提取液真空干燥后衍生生化，第一步是做methoximation(25mg/ml methoximine reagent 溶解在吡啶中),第二部做silylation(BSTFA:TMCS=99:1)，然后gc-ms分析。以前一直使用这个方法测定，氨基酸和有机酸信号稳定。但是从5月份开始，突然无法从提取样品中测到氨基酸（氨基酸峰完全消失了），但是有机酸还可以检测到。更换色谱柱，清晰inlet等，问题依旧存在，实在不知道原因，怀疑是衍生化过程引进了水，但是试剂一直保存很好。请达人帮忙！！谢谢了！
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dengpingzi
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2011/6/10 13:24:51 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您好！我想请教一下，我们单位想开展对富硒酵母中的硒代蛋氨酸的检测，一直查不到相关的方法。不知道可不可以用类似你这样的方法处理，然后用GC/MS检测呢？能不能将您的方法给我参考一下，不胜感激！

原文由 sysun2005(sysun2005) 发表:
遇到一个很怪的实验结果。测定细菌细胞内氨基酸和有机酸的含量，细胞提取液真空干燥后衍生生化，第一步是做methoximation(25mg/ml methoximine reagent 溶解在吡啶中),第二部做silylation(BSTFA:TMCS=99:1)，然后gc-ms分析。以前一直使用这个方法测定，氨基酸和有机酸信号稳定。但是从5月份开始，突然无法从提取样品中测到氨基酸（氨基酸峰完全消失了），但是有机酸还可以检测到。更换色谱柱，清晰inlet等，问题依旧存在，实在不知道原因，怀疑是衍生化过程引进了水，但是试剂一直保存很好。请达人帮忙！！谢谢了！
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Ins_de16e6ed
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2023/2/10 15:53:19 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问一下，这个问题最后如何解决的呀？我也是出现了同样的问题，前期测好好的，后期测氨基酸标样的时候，完全不出峰，只出现溶剂峰，然后测其他的能出峰。并且时候测细胞酸解后的AAS，同样处理方法也出峰
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2023/5/29 14:01:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_de16e6ed(Ins_de16e6ed) 发表:
请问一下，这个问题最后如何解决的呀？我也是出现了同样的问题，前期测好好的，后期测氨基酸标样的时候，完全不出峰，只出现溶剂峰，然后测其他的能出峰。并且时候测细胞酸解后的AAS，同样处理方法也出峰
请问干燥后加衍生试剂（甲氧基胺盐酸吡啶溶液+BSTFA）了？需要再加溶剂吗？
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Ins_1e6697d3
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2023/10/12 16:33:31 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您好。我是一名研二在读生，后续课题也要做细菌的氨基酸检测，但实验室没有该方面的经验，之前也尝试过一次很失败，请问可以借鉴一下您的方法吗
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