主题：【讨论】药检仪器连连看，欢迎大家来畅谈（参与就有奖）

采用液相色谱仪测定阿司匹林片，抢个第一当当！

高效液相色谱法测定吡拉西坦葡萄糖注射液的有关物质
吡拉西坦葡萄糖注射液是国家四类新药，为脑代谢改善药，用于脑动脉硬化症及脑血管意外所致的记忆和思维功能减退的治疗。其前期质量研究工作中没有涉及有关物质的检测和控制，为了保证生产和储备过程中产品的质量，笔者对吡拉西坦葡萄糖注射液有关物质进行了全面考察，现将结果报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料仪器与试药：美国Agilent 1100高效液相色谱仪；Agilem 1100系列紫外多波长检测器、自动进样器、柱温箱、四元泵、真空脱气机，Agilent 1 100化学工作站；KQ3200超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)；SYZ-550石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏省金坛市金城国胜实验仪器厂)；乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水；吡拉西坦注射葡萄糖液(批号031021N、031022、031023)由本公司制剂室提供。

    1.2 实验方法与结果

    1.2.1 色谱条件 色谱柱：ODS柱(5μm，4.6mm×150mm)；流动相：水；流速：1.3ml／min；紫外检测波长：220nm；柱温：25℃；进样量：2Oμl。

    1.2.2 流动相的选择和最佳检测波长的选择 (1)流动相的选择：曾选用甲醇-乙腈-水、甲醇-水等分离吡拉西坦，但主峰的保留时间较短，对主要降解产物5-羟甲基糠醛进行检测，发现与主峰分离不完全，影响主药含量测定，故改用水作流动相进行检测，在此条件下，5-羟甲基糠醛保留时间约在2min，而主药的保留时间约在11min 并对专属性进行考察，破坏试验的降解产物保留时间均不影响主药的含量测定。杂质峰可得到较好地分离和检测。(2)检测波长的选择：吡拉西坦在含量测定浓度下，在2OO～400nm 的紫外扫描图显示，其在220.5nm处有最大吸收，故选择220nm。

    1.2.3 辅料影响试验 精密称取葡萄糖5.0g置100ml量瓶中，加水溶解稀释至刻度，摇匀，制成与吡拉西坦葡萄糖注射葡萄糖浓度相当的溶液；取此溶液1ml置250ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取2Oμl注入液相色谱仪，记录HPLC检测图谱，结果表明：在选定的液相色谱条件下处方量的葡萄糖对测定无干扰。

    1.2.4 专属性试验 (1)高温破坏；分别称取吡拉西坦原料160mg 2份于5Oml量瓶中，1份在120℃烘烤2.5h，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，进行HPLC检测；主要降解产物保留时间约为2.0 min。另1份加水溶解，稀释至刻度，摇匀，在6O℃加热4 h，进行HPLC检测，主要降解产物保留时间约为2.0min，检测结果降解产物与主药分离较好，互不干扰测定。(2)酸破坏：称取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中，加0.1mol／LHCL溶液1ml，溶解，在60℃加热2h，加水稀释至刻度，摇匀，进行HPLC检测，主要降解产物的保留时间约为4.2min，检测结果降解产物与主药分离较好，互不干扰测定。(3)碱破坏：称取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中．加0.1mol／1Na0H溶液1ml，溶解，在6O℃加热2 h，加水稀释至刻度，摇匀。进行HPLC检测。主要降解产物的保留时间约为2.1min和2.4 min，检测结果降解产物与主药分离较好．互不干扰测定。(4)氧化破坏：称取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中，加3O%H2O2溶液0.1ml，溶解，在60℃加热0.5h，加水稀释至刻度，摇匀，进行HPLC检测，主要降解产物的保留时间约为2.0min和2.4min，检测结果降解产物与主药分离较好，互不干扰测定，并说明吡拉西坦极易被氧化。

    1.2.5 测定方法回收率试验 取乙酰胺毗咯烷酮对照品约26、32、38mg，精密称定，分置于1Oml量瓶中，并按处方比加入葡萄糖，用水溶解，稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液，浓度分别为26μg／ml、32μg／ml、38μg／ml；另精密称取乙酰胺吡咯烷酮对照品适量，用水配制成浓度为32μg／ml的对照溶液。分别精密吸取上述样品溶液和对照溶液2Oμl。注入色谱仪，记录峰面积，计算回收率。结果表明在99.9～100.1之间，并且RSD值均小于0.5 。

    1.2.6 样品的有关物质测定 精密量取本品1ml置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试溶液；精密移取1ml置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。精密量取对照溶液2Oμl注入液相色谱仪进行预试，调整检测灵敏度，使主成分色谱峰达满标的1O％～2O％；再精密量取供试液2Oμl注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍，计算各杂质峰面积的和，不得大于对照峰面积(1％)。

    2 讨论

    在方法专属性考察中，主要降解产物的保留时间约为2.0、2.1、2.4和4.2min，降解产物与主药分离较好，互不干扰测定，但目前尚未确定各降解产物的成分，这方面工作将进一步进行研究。在专属性考察中发现，吡拉西坦极易被氧化，所以在检验操作中应予以注意。

葡萄糖注射液：pH值采用酸度计；5-羟甲基糖醛用紫外可见分光光计；含量用旋光仪检测；不溶性微粒用微粒分析检测；可见异物用澄明度检测仪检测。剩下的留给后面的版友吧。

阿司匹林片 高效液相色谱 含量检测

乳酸菌素片，细菌培养的方法检验

盐酸左氧氟沙星也可以用HPLC做

葡萄糖注射液（5% 250ml）：分光光度计

大家好好看看，药品检验的仪器不下几十种，一般都是常规设备。欢迎大家来参与

那氟沙星用HPLC做过！

葡萄糖注射液：pH值采用酸度计；5-羟甲基糖醛用紫外可见分光光计；含量用旋光仪检测；不溶性微粒用微粒分析检测；