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主题：【原创】一般用狭缝几做荧光呢？

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pfz1985
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发表于：2009/06/08 12:53:35 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
狭缝的大小对荧光的强度很重要，大家用多大做呢？
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2009/6/12 17:51:30 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
狭缝大小可根据你所测物质的荧光大小适当的调整。在一浓度在，如荧光过大，超过量程，可调整狭缝来调整荧光强度
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夕阳
anping
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2009/6/12 22:04:46 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 pfz1985 发表:
狭缝的大小对荧光的强度很重要，大家用多大做呢？

不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度，还要考虑分辨率的问题。
对于激发侧而言，狭缝加大有时荧光强度反而减少。
对于荧光侧而言，狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高，但是分辨率随之降低。
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auto1235
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2009/6/12 22:49:46 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度，还要考虑分辨率的问题。
对于激发侧而言，狭缝加大有时荧光强度反而减少。
----仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系，
----你可以自己设计衰减片来手动达到目的。

对于荧光侧而言，狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高，但是分辨率随之降低。
----实际是荧光峰的带宽发生了变化，和紫外可见光度计一样。

----仪器一般还可以手动调节PMT高压的档位或手动设置衰减。
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pfz1985
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2009/6/13 8:11:59 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 anping 发表:
原文由 pfz1985 发表:
狭缝的大小对荧光的强度很重要，大家用多大做呢？

不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度，还要考虑分辨率的问题。
对于激发侧而言，狭缝加大有时荧光强度反而减少。
对于荧光侧而言，狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高，但是分辨率随之降低。
很好！谢谢
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chuanghufeng
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2009/6/18 10:23:57 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
常用1nm或5nm.
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maqin909
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2009/6/30 16:50:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
狭缝的宽度对荧光粉的发光强度是很重要的！
我们实验室有的时候多采用3 nm的！
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shanshunan
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2009/11/21 15:28:28 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 auto1235(auto1235) 发表:

不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度，还要考虑分辨率的问题。
对于激发侧而言，狭缝加大有时荧光强度反而减少。
----仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系，
----你可以自己设计衰减片来手动达到目的。

对于荧光侧而言，狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高，但是分辨率随之降低。
----实际是荧光峰的带宽发生了变化，和紫外可见光度计一样。

----仪器一般还可以手动调节PMT高压的档位或手动设置衰减。


针对这句话“仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系”，我有个疑问，我们实验室用的是瓦里安的cary eclipse荧光光度仪，PMT电压和激发狭缝都可以单独调节，貌似没有什么关系。
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2009/12/4 21:29:27 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问怎么调节PMT的电压？
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slenna
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2010/10/20 15:05:41 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
pmt电压，不是有选择项的吗？？？例如 400 700 250 等等
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夕阳
anping
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2010/10/22 13:20:42 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 shanshunan(shanshunan) 发表:
针对这句话“仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系”，我有个疑问，我们实验室用的是瓦里安的cary eclipse荧光光度仪，PMT电压和激发狭缝都可以单独调节，貌似没有什么关系。


在荧光分光光度计中：光电倍增管的工作电压与仪器的狭缝确实是成反比关系。但是有个前提，就是“当荧光值保持不变时”。
这个关系从实验中很容易判断出来；无论改变那一侧的狭缝，当负高压不变时，荧光值均会下降，要想回到原值，则必须提高复高压。反之则反。
其实，狭缝与光电倍增管负高压的反比关系，不仅仅存在荧光仪上，在紫外可见分光广度计，原子吸收或红外光谱仪上也是一样的，只不过届时的负高压是 自动调整的，使用者不会太关注罢了。
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