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主题：【群英会】亲水色谱我来看

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〓猪哥哥〓
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发表于：2009/07/21 09:26:04 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
亲水色谱我来看


一、亲水色谱的概念和原理
亲水相互作用色谱长期被人们使用，但是HILIC这个名词仅仅是最近才被使用。分析物通常是极性化合物，如极性代谢物，碳水化合物或肽。HILIC 可以被看作正相色谱向水性流动相领域的延续。流动相是水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂。固定相是强亲水性的极性吸附剂，如硅胶键合相，极性聚合物填料或离子交换吸附剂。这些固定相的共同特点是它们和水的作用力很强，因此属于“亲水性”。HILIC模式使用的梯度和反相模式相反。初始条件包括高比例有机相，典型的浓度是95%有机相如乙腈，逐步降低到水相。因此，HILIC色谱又被称为反反相色谱（reversed-reversed-phase），因其使用水溶性有机溶剂，高有机相流动相，低的缓冲盐浓度,不使用离子对试剂，与质谱检测良好的兼容性和灵敏度等优点，应用方面也越来越广泛，也越来越受关注。

二、亲水色谱的特点




附件：亲水色谱的方法研究
三、亲水色谱的应用
亲水色谱的应用领域非常广泛，还有在药物成份分析、药物杂质分析、药物代谢及动力学分析、生物标记、临床诊断、中药现代化、药物纯化等应用。
附件：亲水色谱的相关应用


附录：亲和色谱有关知识
亲和色谱也称为亲和层析，在生物体内，许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等，都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力，根据生物分子间亲和吸附和解离的原理，建立起来的色谱法称亲色谱法。亲和色谱中两个进行专一结合的分子互称对方为配基。如抗原和抗体，抗原可认为是抗体的配基，反之抗体也可认为是抗原的配基。将一个水溶性配基在不伤害其生物学功能的情况下与水不溶性载体结合称为配基的固相化。
亲和色谱法的基本过程是：
1.配基固相化。将与纯化对象有专一结合作用的物质，连接在水不溶性载体上，制成亲和吸附剂后装柱（称亲和性）。
2.亲和吸附。将含有纯化对象的混合物通过亲和柱，纯化对象吸附在柱上，其他物质流出色谱柱。
3.解吸附。用某种缓冲液或溶液通过亲和柱，把吸附在亲和柱上的欲纯化物质洗脱出来
亲和色谱是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和色谱在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离的物质有一定结合能力的分子，并且它们的结合是可逆的，在改变流动相条件时二者还能相互分离。亲和色谱可以用来从混合物中纯化或浓缩某一分子，也可以用来去处或减少混合物中某一分子的含量。
亲和色谱分离的通常是混合在溶液中的物质，比如细胞内容物、培养基或血浆等。待分离的分子在通过色谱柱时被固定相或介质上的基团捕获，而溶液中其他的物质可以顺利通过色谱柱。然后把固态的基质取出后洗脱，目标分子即刻被洗脱下来。如果分离的目的是去除溶液中某种分子，那么只要分子能与介质结合即可，可以不必进行洗脱。

讨论：
=====================================================================
1、你用过亲水色谱吗？用过哪些厂家哪个型号的呢？
2、你用亲水色谱一般分析什么成分？与其他色谱分析相比较它有什么优点和缺
陷呢？
3、从以上图中可以看出亲水色谱在正相色谱、反相色谱和离子色谱中都有交叉
应用，你觉得亲水色谱会取代这上面这三种色谱方式吗？
附件：
亲和色谱的相关应用
亲和色谱的方法研究
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emoc98311
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2009/7/21 11:32:05 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般都用于生物样品的分析，太过专业
没用过
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mlb2003
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2009/7/21 12:25:17 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有用过，“从以上图中可以看出亲和色谱在正相色谱、反相色谱和离子色谱中都有交叉应用，你觉得亲和色谱会取代这上面这三种色谱方式吗？”个人认为短时间内应该不会取代，除非亲和色谱能够改进，在应用领域，使用性能等方面都达到另外三种色谱的程度才有可能被取代；（参与讨论，个人观点！）
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symmacros
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2009/7/21 12:41:08 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多谢介绍。亲和色谱多用于生物，药物等领域。可惜还没用过。
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tosohsh
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2009/7/21 14:39:14 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感谢提醒！
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Last edit by 03yx2
冷咖啡
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2009/7/21 15:54:32 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
听说过，现在了解了！
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abcde
xyzwz123
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2009/7/21 17:14:18 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、你用过亲水色谱吗？用过哪些厂家哪个型号的呢？
2、你用亲水色谱一般分析什么成分？与其他色谱分析相比较它有什么优点和缺
陷呢？
3、从以上图中可以看出亲水色谱在正相色谱、反相色谱和离子色谱中都有交叉
应用，你觉得亲水色谱会取代这上面这三种色谱方式吗？

1. 用过，如Waters Hillic, TSK, Merck Sequant

2. 极性成分，优点：反相不保留的它能保留

3.相互补充
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Last edit by xyzwz123
〓猪哥哥〓
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2009/7/22 17:24:18 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
亲水色谱没有用过。
但是如果亲水色谱要取代其他的色谱方式，还需时日。毕竟各种色谱方式各有优势，无法代替。
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柏坡
hgycook
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2009/7/22 20:03:52 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个还得好好学习学习，目前没用过。
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Last edit by hgycook
kyoren
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2009/7/23 9:01:31 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
旧的都没有学好,新的又来了,赶不上哦!
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小木
haoyuaimama
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2009/7/23 11:27:46 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
来捧场，嗯，要是做一些特殊的物质，我觉得是个不错的选择
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