主题:【第二届网络原创作品大赛】手性分析经验谈

浏览0 回复39 电梯直达
xiehong3344530
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啊,看了很多手性书,觉得都是理论层面上的,今天看到楼主的帖,受益匪浅
xiehong3344530
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使用的原则一般是酸性样品加酸,碱性样品加碱,但实际上很多样品是即含酸性基团又含碱性基团,这就要看哪个基团作用强了,对于某些含氨基的两性样品,例如苯甘氨酸,甲基磺酸是一个非常好的选择,磺酸基能够抑制氨基的碱性,又能提供一个酸性的流动相环境,使样品既能得到很好的分离又能获得对称的峰形。
有些样品只添加碱或者酸效果不好,可以尝试在样品里同时添加酸或者碱,这样的样品我曾经遇到过,只添加酸或碱样品都拖尾,不能达到基线分离,这种情况下通过酸碱同时加入,最后获得了非常漂亮的峰形和良好的分离度。实际操作中有些样品碱性太强,进样以后根本不成峰,低波长下细看似乎能感觉到基线一直在漂,开始时怀疑样品浓度不够,加大样品浓度以后仍看不到样品峰,流动相加入二乙胺或三乙胺以后再进样,得到比较漂亮的样品峰。
有时我们发现原来用中性流动相分离很好的一个偏酸性的样品,柱子用过碱性流动相以后再用中性流动相去做,发现样品峰不能达到基线分离,拖尾严重,甚至不成峰,这时可以往流动相里添加一滴酸,或者柱子用酸性流动相冲洗一下再用中性的流动相,一切又正常了,同理,用过酸性流动相的柱子去做弱碱性的样品会有一样的问题。残留在柱子上的酸或碱最好是用碱或酸性的流动相来清洗,有条件的话尽量固定一只柱子只用酸性流动相或只用碱性流动相。



对这几段经验我的理解是尽量不让样品离子化,对吗?
pandora98
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主要考虑样品结构式上的特殊官能团与色谱柱填料之间的作用。
这里所讲的特殊官能团主要有氨基(包括氨基类似结构和含N的结构)、羧基(包括二酸、硼酸、磺酸等酸性基团)、羟基等容易与填料上的硅羟基发生作用的基团。
一般的酸性样品加酸、碱性样品加碱,是通过在流动相里加入酸性或者碱性物质,达到竞争性抑制样品与硅羟基之间的作用的目的。
含氨基的物质加甲基磺酸,一方面可以抑制硅羟基的解离,降低硅羟基与样品的作用,另一方面甲基磺酸与样品相互作用,降低样品与硅羟基的作用,抑制拖尾,改变样品的极性。
dearwlz
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jill_0103
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原文由 pandora98(pandora98) 发表:
原文由 zhaohaiyun 发表:
经验之谈!赞一个!
看理论是很累的。。。
不知楼主有没有用SFC做过,最近好像国际上用SFC进行手性分析的很热。
如能给些使用经验就好了。

SFC我们没有,但是我去别的单位借用过一次,感觉还可以,就是基线不太好。
SFC要求柱温高一点,但是大赛璐手性柱温度上限就是40度,感觉SFC使用起来受限制。
现在做SFC的仪器厂家就一个,而且最近两年这个仪器被卖来卖去,不是很稳定,好像最近被卖给了Waters,期待这个仪器能有长足的进步。


SFC温度一般使用多少温度呢? Phenomenex Lux手性柱温度上限为50度。耐压为300bar。
shenlihua
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请问一下,样品的浓度要如何确定呢?是看峰面积吗?
shih20j07
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老师你好,我以前是做电泳手性分离的,想改行搞液相色谱手性分离,能不能给我提供一些您发表的文章啊!
shih20j07
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另外您说,您分离了几千种物质,可不可以给我透露一下,您都分离过哪些物质。
seanxiao2000
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