主题：【专题讨论第一期】进样前的阅兵

原文由 wyqql2060 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次使用液相是一个老员工教的,他也不怎么懂(后来一些仪器方法的制度都是我牵头建立的),说的最多的就是要细心,当然“排气需开排气阀，做完样品冲柱子”也常说。

2、你的开、关机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
Agilent1200，先开检测器（不开灯），让泵，再开恒温箱，再进样前30min打开灯源（节约），做样一结束，首先关检测器的灯（节约）和恒温箱，再关泵。最后才是检测器。这样做的目的就是延长灯使用寿命的前提下，最大程度检测仪器的使用情况。

3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
我们血液制品人血白蛋白，免疫球蛋白。前处理很简单，如果是做麦芽糖就要去蛋白（加磺基水杨酸）室温4h。
不管如何进样前都是要经0.45微米的滤膜。

原文由 yangshaobo 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
师兄指导我第一次使用液相，强调的最重要的一个环节就是换柱子时如何拆卸、安装柱子，再就是检测器不要经常开关。
2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
用的是戴安的HPLC，好久不做了忘了具体型号，顺序是：打开泵，开始自检、洗泵，然后排气，然后打开检测器预热30min，打开变色龙工作站，设定流速、检测波长等，平衡基线，然后上样，做完样品用乙腈冲柱子。
3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
我们实验室做的是微生物活性物质的分离纯化，大多是一些多肽类物质，发酵液经硫酸铵盐析（或者大孔吸附树脂处理）、离子交换层析（或者分子筛层析、TLC）等处理，收集有效组分冷冻干燥后上HPLC，确定分离条件，再用制备液相制备，然后用NMRI测定其结构。

原文由 huangzhiqiao456 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次使用液相恰好碰到的是师兄（研究生），呵呵，排气的时候一定要把排气阀给打开了，然后，排完气后，要把排气阀给关上才能有压力。
2、你的开、关机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
岛津 LC-10AT 呵呵，很古老吧，我感觉啊，就是以前稍有钱的用的大多是岛津了，这个型号的比较普遍，也有挺好的精确度，很锻炼人的哦
开机顺序是：先开泵，再打开检测器，呵呵，都差不多了各种型号的。应为检测器是有寿命的，一打开，就意味着3个小时的寿命。
关机顺序是：先关泵，再关工作站，前提是你已经把柱子给冲洗好了
检测器：晚点开，早点关。

3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
我作的是生物碱兼萜类，我从药材的提取，到过柱子，然后在重结晶，定容，膜过滤（续滤液），进样

原文由 hgycook 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次接触应该是在学校了，当时好像是台岛津的10A，感觉很金贵的样子，老师做的示范，我们都看着。机器放置的房间比较好，整个空间都好像被毯子包裹起来了，呵呵。（是不是夸张了），老师说的最多的就是他那根进样针，总是强调它会弯调！再后来进了工厂，那时候才知道原来液相也能放在外面！

2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
现在用的是岛津的机器，每天一开机后做的事就是purge，大概1个小时吧，然后才开始工作。

原文由 03yx2 发表:

原文由 hgycook 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次接触应该是在学校了，当时好像是台岛津的10A，感觉很金贵的样子，老师做的示范，我们都看着。机器放置的房间比较好，整个空间都好像被毯子包裹起来了，呵呵。（是不是夸张了），老师说的最多的就是他那根进样针，总是强调它会弯调！再后来进了工厂，那时候才知道原来液相也能放在外面！

2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
现在用的是岛津的机器，每天一开机后做的事就是purge，大概1个小时吧，然后才开始工作。

purge 1h，应该是平衡1h吧。

原文由 03yx2 发表:

原文由 yangshaobo 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
师兄指导我第一次使用液相，强调的最重要的一个环节就是换柱子时如何拆卸、安装柱子，再就是检测器不要经常开关。
2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
用的是戴安的HPLC，好久不做了忘了具体型号，顺序是：打开泵，开始自检、洗泵，然后排气，然后打开检测器预热30min，打开变色龙工作站，设定流速、检测波长等，平衡基线，然后上样，做完样品用乙腈冲柱子。
3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
我们实验室做的是微生物活性物质的分离纯化，大多是一些多肽类物质，发酵液经硫酸铵盐析（或者大孔吸附树脂处理）、离子交换层析（或者分子筛层析、TLC）等处理，收集有效组分冷冻干燥后上HPLC，确定分离条件，再用制备液相制备，然后用NMRI测定其结构。

制备色谱，你们用的也是戴安的吗？

原文由 yangshaobo 发表:

原文由 03yx2 发表:

原文由 hgycook 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次接触应该是在学校了，当时好像是台岛津的10A，感觉很金贵的样子，老师做的示范，我们都看着。机器放置的房间比较好，整个空间都好像被毯子包裹起来了，呵呵。（是不是夸张了），老师说的最多的就是他那根进样针，总是强调它会弯调！再后来进了工厂，那时候才知道原来液相也能放在外面！

2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
现在用的是岛津的机器，每天一开机后做的事就是purge，大概1个小时吧，然后才开始工作。

purge 1h，应该是平衡1h吧。

我记得purge 3min就差不多吧？呵呵

原文由 yangshaobo 发表:

原文由 03yx2 发表:

原文由 yangshaobo 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
师兄指导我第一次使用液相，强调的最重要的一个环节就是换柱子时如何拆卸、安装柱子，再就是检测器不要经常开关。
2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
用的是戴安的HPLC，好久不做了忘了具体型号，顺序是：打开泵，开始自检、洗泵，然后排气，然后打开检测器预热30min，打开变色龙工作站，设定流速、检测波长等，平衡基线，然后上样，做完样品用乙腈冲柱子。
3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
我们实验室做的是微生物活性物质的分离纯化，大多是一些多肽类物质，发酵液经硫酸铵盐析（或者大孔吸附树脂处理）、离子交换层析（或者分子筛层析、TLC）等处理，收集有效组分冷冻干燥后上HPLC，确定分离条件，再用制备液相制备，然后用NMRI测定其结构。

制备色谱，你们用的也是戴安的吗？

制备不是戴安的，是labtech的，毕业了，好久不做HPLC了所以具体型号忘了，呵呵。只记得价格好像是9w多点。

原文由 xy4585618 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
学校的老师教我第一次认识了液相，单位的同事教我第一次我独立使用液相！
不光水要过滤，有机相也应该过滤！
印象最深的一次是用水膜过滤有机溶剂，结果膜溶解，结果损失了一个抽滤瓶