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主题：【原创】缓冲盐使用不当对色谱柱有什么影响？

浏览0 回复28 电梯直达

zxhcnf

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发表于：2009/10/13 12:31:38 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

缓冲盐使用不当对色谱柱有什么影响？

在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调节流动相的pH值，缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造
成柱压升高、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响：
1）柱压升高；
原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出，堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙，阻碍流动相传质，引起柱压升高。
2）相同化合物的保留时间发生变化；
原因：如果没有冲洗干净就进行进样，色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化。
3）柱效下降；
原因：i）有些缓冲盐会渗入到键合相的深处，损害硅胶基体，导致色谱柱键合相流失，柱床变松，柱效下降；ii）凝结在键合相表面，使C18碳链难以舒展，对物质的保留能力下降，导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗，流动相中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。

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2009/10/13 20:43:58 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

冲洗色谱柱是我们大多使用的是水，但是水会冲坏色谱柱内的碳结构，有什么好的方法吗？尤其是缓冲盐很多时？

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1234chen

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2009/12/4 11:52:21 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

zxhchf 在另外一个贴子里写了方法。
缓冲盐析出的补救方法：
1）方案1：用甲醇/水＝20/80以1.0ml/min流速35℃条件下反向冲洗色谱柱120min；
2）方案2：用甲醇/水＝20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。
反向冲这么久，会不会冲坏了？

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zxhcnf

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2009/12/4 15:17:20 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 1234chen(1234chen) 发表:
zxhchf 在另外一个贴子里写了方法。
缓冲盐析出的补救方法：
1）方案1：用甲醇/水＝20/80以1.0ml/min流速35℃条件下反向冲洗色谱柱120min；
2）方案2：用甲醇/水＝20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。
反向冲这么久，会不会冲坏了？

不会的，Welch公司的色谱柱两端的筛板孔径是相同的，正着用反着用，正着冲反着冲都是可以的，不会对柱床造成什么影响

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雪妖

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2009/12/4 15:58:10 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最好不要反冲，
我一般这样做的，肯定不会有问题：
一天检测完了以后，留至少40分钟冲洗色谱柱
不管流动相的比例是多少，冲色谱柱时都用10%的甲醇水溶液，1ml/min冲30min以上，肯定不会有问题，有时间就再用40%甲醇水溶液冲30min。没有时间保持过夜或三五天是没有问题的

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fulinx

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2009/12/5 14:20:19 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

忘了冲柱子就废了!

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zxhcnf

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2009/12/5 19:55:01 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 小卢(luxw) 发表:
冲洗色谱柱是我们大多使用的是水，但是水会冲坏色谱柱内的碳结构，有什么好的方法吗？尤其是缓冲盐很多时？

用水冲洗色谱柱不超过60min通常不会有什么太大的问题，但长时间冲洗容易导致“相塌陷”，“相塌陷”是指保留时间越来越短，最后一点保留都没有，样品进去后在死体积的位置就出来了；“相塌陷”通常用纯甲醇或纯乙腈冲洗60min后可以恢复。在您的流动相中如果含有缓冲盐时，您可以看一下这个帖子，但愿能对您有点有益的帮助。http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20091019/2165174/

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