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主题：【极限体验活动&原创大赛】Ultimate短柱在生物样品分析中的应用

浏览0 回复27 电梯直达
dickwang2008
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发表于：2009/10/23 10:27:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被yongzhbenq设置为精华；
1.前言

以前在学校时，曾试用过月旭公司的色谱柱产品。试用后，购买了两根C18的质谱用短柱，用于生物样品的分析。本文将简单介绍该色谱柱用于试验的相关内容，并验证其灵敏度、耐用性等。

2.试验试剂及仪器

2.1试验试剂
    去离子水 (Milli-Q water purification system)
    乙腈, HPLC 级, Fisher Scientific
    甲酸, 分析纯级       
    样品结构及其来源（项目要求，故不能写出）


2.2仪器
    API 3200 Q-Trap triple quadrupole mass spectrometer with Analyst software 1.4.2 (Aplied Biosystems)
    Agilent 1200 HPLC system
    Leap HTC PAL autosampler
    Ultimate XB-C18 column (30 mm×2.1 mm, 3 μm), Lot Number: Ult3B18203, Serial Number:110801551
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dickwang2008
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2009/10/23 10:27:13 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3. 试验内容
3.1 色谱条件
流动相:             A = 0.10 % formic acid in DI water
             B = 0.10 % formic acid in methanol
                           
进样器温度:      4 °C
保留时间:        Analyte A = 2.4 min; IS = 2.5 min
运行时间:        4.5 min
进样体积:        20 L

洗脱程序:





3.2    质谱条件
质谱:                API 3200 Q-Trap with Analyst software 1.4.2
离子源:                   ESI源（+）
离子源电压:             5500V
监测模式:                 MRM
帘气:                      15
源温度:                     550 C

离子反应：






3.3    样品处理方法
将40μL的样品置入1.5mL的Eppendof管中，加入IS的乙腈溶液40μL，然后加入40μL的乙腈，涡旋30s，在15000 r.p.m下高速离心10min。取上清液100μL至另一管中，加入100μL的0.1%甲酸水溶液，涡旋30s，进样分析。
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2009/10/23 10:27:20 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3.4    谱图分析

Blank



Zero


由Blank图可知，生物基质中的内源性物质不干扰待测物的测定；由Zero图可知，内标不干扰待测物的测定。

Standard Curve




Sample





由Standard Curve图知，该方法线性良好；从Sample图中可知，待测物的半峰款大概为0.5-0.6min，柱效高。
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2009/10/23 10:27:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3.5    使用心得
本人在以前使用Ultimate系列色谱柱的过程中，跟其他公司同等类型的柱子 从柱效、半峰宽、耐用性等方面进行了比较，所以这次购买时清楚的知道试验需要什么类型的色谱柱，直接购买。
本实验共分析生物样品1000余个，在试验前后
1). 在上述色谱条件下，柱压变化不大，基本维持在90bar左右；
2). 化合物的色谱峰较锐，半峰宽一直维持在0.06-0.08min，柱效没有明显下降；
3). 该色谱柱的耐用性很好，在每个批次分析结束后按说明书上冲洗一下即可。
本人来公司后曾购买过Ultimate系列的相关产品，当时我们跟销售事先说明要考察一下柱子的耐用性，所以试用时间可能会长一些，如果效果满意我们很快付款。但后来负责的销售人员以年度结账为由一直追要货款，而且态度相当不好，所以领导批示以后不要再购买。偶然的机会，我把这个情况跟月旭公司反应了一下，他们说这个销售已经被辞退，并且公司也向我们承诺以后决不会发生此类事情。由此也说明了月旭公司开拓中国市场的决心，他们的员工能为客户提供满意的服务。

祝愿“极限体验活动”取得圆满成功。
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2009/10/23 10:27:35 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这仅是一个简单的方法，由于时间有限很多内容没写出来，如各位有问题，可以跟帖交流，谢谢。
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〓疯子哥〓
madprodigy
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2009/10/23 10:41:58 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
dickwang2008版主厉害啊，这么短的时间就写出了心得，佩服佩服，希望其他的用户也积极参与极限色谱柱体验活动哦
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samanthalas
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2009/10/23 12:09:30 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感谢dickwang2008写出这么好的文章，为本次“极限体验”活动打响了第一炮，有一个良好的开始！为表示鼓励，月旭公司临时决定，为dickwang2008赠送价值72元安利丽齿健牙膏两盒，作为第一个发表试用文章的特殊奖励。第二名和第三名同样可以获得此奖，请大家快快参与！
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plexu
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2009/10/23 12:53:32 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感谢Dichwang的积极参与！
10月份还只剩下一周的时间，10月份的5个月度奖，将在11月初评出。如果发的文章总共在5篇以内，将会是个人人有奖的结果！想拿奖的请抓紧时间发帖，机不可失！
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dickwang2008
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2009/10/23 13:29:19 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 samanthalas 发表:
感谢dickwang2008写出这么好的文章，为本次“极限体验”活动打响了第一炮，有一个良好的开始！为表示鼓励，月旭公司临时决定，为dickwang2008赠送价值72元安利丽齿健牙膏两盒，作为第一个发表试用文章的特殊奖励。第二名和第三名同样可以获得此奖，请大家快快参与！


谢谢，那大家赶紧申请柱子试用吧
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belek
belek
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2009/10/23 14:45:46 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好文章，我也要申请啊
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柏坡
hgycook
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2009/10/23 21:53:26 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
正在试用，感觉还不错。
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