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凝胶色谱（GPC）
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主题：【求助】GPC样品如果超过柱子的分离上限会怎么样？

浏览0 回复9 电梯直达
rasree02
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发表于：2009/11/20 23:28:51 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近组建了WATERS 2695+2489+protein-pak 的一个GPC体系，柱子的分离范围是1000-20000，现在我想跑一个蛋白混合样品，其最大分子量的上限超过了20000，我想知道可不可以用这个柱子分离？误差会有多大？
还有如何选择合适的标准品，是不是标准品的范围也不能超过20000这个上限？
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2009/11/20 23:59:35 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也不会怎么样，测不准而已。
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rasree02
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2009/11/22 17:25:50 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
能说的具体点吗。。。我刚接触GPC不久，那我选标准品的时候，应该怎么选择呢？能不能用超过柱子分离范围的标准品呢？
因为Empower软件的数据都是根据标准品画得曲线来的，如果我的标准品做的不够大，那么数据就会少
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有水有渝
xky0230699
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2009/11/22 19:05:03 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不能换一根测试范围大的柱子吗？样品分子量一定要在标准曲线范围内才行。
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liumanlan
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2009/11/22 19:54:06 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
由于操作疏忽，温度超过了柱子的最高使用温度20度已个小时，请问柱子还可以用吗？
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2009/11/22 21:55:24 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做下柱测试，多少会有影响，甚至不可用了。
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sunny_windy110
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2009/12/13 18:50:08 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
超出柱子的分离上限后，理论上的淋洗行为时大于20000的样品一起淋洗出来，那个淋洗峰就会起峰非常陡峭，不是对称的高斯峰
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hyhlly
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2009/12/13 21:20:35 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品分子量超过GPC柱的测量上限时就会发生全排阻，换句话说就是对样品得保留很弱。那么样品组分很快就会流出，达不到足够的分辨率，当然前提是分子量大得不多。而且个人认为混床线性柱可能弹性范围会稍大些。
    至于说标准样应该是可以超过柱的检测上限的，安捷伦的PLgel MIXED-凝胶柱分子量上限为2M，但是所配置的标样最高的却达到了5M。而且所作的标准曲线线性仍然很好。
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lwlwb
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2009/12/23 17:02:28 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
超过柱子最大分子量的组份会在同一时间出峰，你拿不到这部分数据是肯定的。
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shandian709
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2010/1/9 19:04:25 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大于分离极限的物质会一起首先被淋洗出来，测定的物质分子量必须在柱子的分离范围内。
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