昨天工作时,按美国药典,用
液相测哌拉西林的含量,第一针结果就显示氨苄西林和哌拉西林的分离度不合格,因为没有柱子可以替代了,只好寻求别的解决办法。同事首先建议将分离度溶液稀释后试试,可惜这招不灵,分离度更低了;后来色谱柱管理员发话了,把柱子反装试试。装好后,平衡大概5分钟(甚至不到),立即进样,分离度合格了,见到这结果实在太高兴了。就没想太多别的,例如系统稳定不稳定的问题。接下来,就出现使实验无法进行下去的问题:每一针的保留时间都在变化。前六针是向前飘,后五针又大幅向后飘,最终超出正负0.05的漂移范围。主管无奈地宣告实验失败。
之后大家分析原因,只是认为柱温的影响,真是一个很没有说服能力的解释。经仔细回想,终于找到令自己满意的解释:因为当时为了及时完成任务,自己太着急了,柱子反装后没有充分平衡,见分离度合格后就立即进样,导致如此。
总结:在有柱温箱的前提下,保留时间飘移,很可能是柱子没有平衡好。心急吃不了热豆腐啊。
疑惑:柱子在反装之前已经平衡过了,为什么反装后还需平衡呢?柱子里的微观结构是怎样的?望知者不吝赐教!