主题：【求助】峰型不好怎么分析是仪器的原因还是柱子的原因啊

原文由 青林(wyqql2060) 发表:
流动相可能也有问题的

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
我认为仪器上的可能性不大，有可能是水、乙腈或蛋白质累积造成的。

第一.您这几个谱图由好变化的时间间隔多久不太清楚，因为要考虑是否是污染引起的累积效应，如果知道变化的时间会比较好判断；

第二.这个问题可能跟您用的水、乙腈有关，请确认一下最近是否换过跟以前不同的水或乙腈品牌，之前我有一个做三聚氰胺的朋友用我们的柱子做样，发现在主峰后面总有一个比主峰更大的峰，后来查明是乙腈的原因；

第三.您做三聚氰胺的前处理方法是否是用国标方法，这没说明白，因为如果不是国标方法，有可能蛋白没有除干净，需要冲洗蛋白。蛋白累积到一定程度的时候是有可能造成这样的影响的，除蛋白的方法：乙腈：水：三氟乙酸＝50：50：0.1以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min，如果不是Welch公司的色谱柱，请不要反向冲洗。通常反向冲洗的效果会比较好，但正向冲洗也能起作用。

原文由 快乐(ynsfeed) 发表:

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
我认为仪器上的可能性不大，有可能是水、乙腈或蛋白质累积造成的。

第一.您这几个谱图由好变化的时间间隔多久不太清楚，因为要考虑是否是污染引起的累积效应，如果知道变化的时间会比较好判断；

第二.这个问题可能跟您用的水、乙腈有关，请确认一下最近是否换过跟以前不同的水或乙腈品牌，之前我有一个做三聚氰胺的朋友用我们的柱子做样，发现在主峰后面总有一个比主峰更大的峰，后来查明是乙腈的原因；

第三.您做三聚氰胺的前处理方法是否是用国标方法，这没说明白，因为如果不是国标方法，有可能蛋白没有除干净，需要冲洗蛋白。蛋白累积到一定程度的时候是有可能造成这样的影响的，除蛋白的方法：乙腈：水：三氟乙酸＝50：50：0.1以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min，如果不是Welch公司的色谱柱，请不要反向冲洗。通常反向冲洗的效果会比较好，但正向冲洗也能起作用。

个人觉得样品前处理的问题，本来三聚氰胺就是为了提高蛋白的，所以，样品本身含的蛋白也高，前处理很难全部除净，这样，检测时间长了，色谱柱就会有吸附，这样就会造成影响。

原文由 ruby70303(ruby70303) 发表:

原文由 快乐(ynsfeed) 发表:

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
我认为仪器上的可能性不大，有可能是水、乙腈或蛋白质累积造成的。

第一.您这几个谱图由好变化的时间间隔多久不太清楚，因为要考虑是否是污染引起的累积效应，如果知道变化的时间会比较好判断；

第二.这个问题可能跟您用的水、乙腈有关，请确认一下最近是否换过跟以前不同的水或乙腈品牌，之前我有一个做三聚氰胺的朋友用我们的柱子做样，发现在主峰后面总有一个比主峰更大的峰，后来查明是乙腈的原因；

第三.您做三聚氰胺的前处理方法是否是用国标方法，这没说明白，因为如果不是国标方法，有可能蛋白没有除干净，需要冲洗蛋白。蛋白累积到一定程度的时候是有可能造成这样的影响的，除蛋白的方法：乙腈：水：三氟乙酸＝50：50：0.1以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min，如果不是Welch公司的色谱柱，请不要反向冲洗。通常反向冲洗的效果会比较好，但正向冲洗也能起作用。

个人觉得样品前处理的问题，本来三聚氰胺就是为了提高蛋白的，所以，样品本身含的蛋白也高，前处理很难全部除净，这样，检测时间长了，色谱柱就会有吸附，这样就会造成影响。

快乐有没有什么好的建议改善这种情况呀？呵呵，学习一下。