2.由于微量注射器不易精确控制进样量,当采用外标法测定供试品中某杂质或主成分含量时,以定量环进样为好。
(三)加校正因子的主成分自身对照法
(四)不加校正因子的主成分自身对照法
(五)面积归一化法
由于峰面积归一化法测定误差大,因此,本法通常只能用于粗略考察供试品中的杂质含量。除另有规定外,一般不宜用于微量杂质的检查。方法是测量各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积,计算各峰面积占总峰面积的百分率,即得。
八、注意事项
1.虽然泵能耐压6000PSI的压力,但不要使泵处于4000PSI以上的压力为宜。
2.安装及拆卸色谱柱时应注意柱的连接方向,千万不能接反。否则可能导致柱效降低,甚至损坏色谱柱。
3.严禁开空泵。在无流动相通过时不要扳动进样阀的操作杆,使用时要注意尽可能少扳动,以免磨损内部的密封垫圈。
4.为了延长检测器灯源的使用寿命,在色谱泵稳定后再打开检测器电源开关,分析结束后立即关闭检测器。
5.应使用高纯度、高质量的溶剂和试剂。
6.避免pH值超限,pH值应控制在2.2~7.5之间。pH值偏低或偏高都会腐蚀
液相系统的不锈钢材料;破坏色谱柱填料的结构,使填料失活。
7.色谱柱温不能超过规定要求,柱温过高会加速色谱柱填料老化,破坏其结构。
8.使用所有溶剂必须是互溶的。这对于缓冲流动相来说是非常重要的,盐类的析出会很快损坏要维护的部件。
9.流动相首选甲醇-水系统,如经试用不适合时,再选用其他溶剂。为保护仪器,应尽可能少用含有缓冲液的流动相。如果流动相中含有缓冲剂,每日使用后应用不含缓冲剂的流动相或新鲜纯化水将仪器管路、泵、进样阀、色谱柱及检测池等充分冲洗干净。
10.如果
液相系统使用未过滤的洗脱液、注入未过滤的样品、系统中滞留缓冲洗脱液都能堵塞系统或划伤泵柱塞。所以流动相、样品使用前必须用0.45μm微孔滤膜过滤;流动相并先经脱气处理后使用。停泵后决不允许缓冲洗脱液滞留在系统中,须用经过滤后的新鲜纯化水进行清洗,并保证将缓冲剂冲洗干净。
11.如果泵闭置在2天以上,应将甲醇注满
液相系统,以避免水溶剂系统中可能存在微生物的繁殖。
12.色谱柱保存时应使填充剂处在润湿状态,两端密塞。反相柱(如十八烷基硅烷键合硅胶柱)可在甲醇中保存;正相柱(如硅胶柱)可在正己烷中保存等。
13.决不能使用盐酸溶液。一般来说,任何浓度的卤化物都会腐蚀未经钝化的不锈钢材料。
14.尽量避免使用在电化学过程中引起腐蚀的金属离子。应避免的典型金属离子有锰、铬、锌、铜、镍、钼、铁。
九、允许差
含量测定的精度,除另有规定外,其相对标准偏差应不大于2.0%。