紫外可见分光光度计(UV)

主题:【讨论】热电和岛津

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scq123
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很奇怪,用热电evolution300做样品测试。
在参比和样品池中都加入THF基线校正后,参比和样品池仍然是THF进行紫外扫描发现在190-220nm范围内吸光度曲线不平,最高处吸光度有1.0。
但据说一样的情况在岛津的紫外里没有发生,很奇怪,谁能解释一下????
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夕阳
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原文由 scq123(scq123) 发表:
很奇怪,用热电evolution300做样品测试。
在参比和样品池中都加入THF基线校正后,参比和样品池仍然是THF进行紫外扫描发现在190-220nm范围内吸光度曲线不平,最高处吸光度有1.0。
但据说一样的情况在岛津的紫外里没有发生,很奇怪,谁能解释一下????



(1)样品室内仅放两支空的比色皿,然后做200~300nm波长区域的基线校正。
(2)将THF倒入样品杯中后进行扫描,观察THF的最大吸收峰在何处及峰值是多少?
(3)我推测这个THF试剂在紫外区的吸收值一定很高,这就是造成校正后的基线不稳的原因。
(4)岛津的仪器“据说”不会发生上述现象,但这只是“据说”而已,楼主亲自验证过吗?
(5)如果岛津的仪器确实可以做到校正基线很平坦,那么这两台仪器之所以会产生这样大的差别,其原因可能是检测器不同的原因。使用光电倍增管的仪器比使用光电二极管的仪器对于紫外区元素的灵敏度要高,故信噪比要好。楼主可以仔细调研一下各自仪器的检测器的类型便知了。
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祥子
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jixf_1114
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打开长时间放置后的THF会被氧化产生具有强紫外吸收的氧化物,这样的情况遇到很多次了。多半可能是THF的原因,用空气试试
scq123
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THF是一个老师拿过来做的,他认为190-220有样品的吸收,所以他对evolution300的结果不满意,另一个实验室有岛津的,相同的东西就拿过去又做了一次,他觉得岛津的在190-220区间没出现这个问题,但我没去看他最后的结果图。因为心里很不舒服。
另外,不只thf出现毛刺,二氯甲烷,和dmf都有毛刺现象出现,但出现的位置有不同,乙醇和水就比较好。
我觉得应该是截止波长的不同导致的,在截止波长以下的光完全被吸收了。但毛刺也太厉害了一点。
scq123
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Spain
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呵呵,anyway,热电evolution300/600总归是没有岛津2450/2550好的。
夕阳
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原文由 scq123(scq123) 发表:
THF是一个老师拿过来做的,他认为190-220有样品的吸收,所以他对evolution300的结果不满意,另一个实验室有岛津的,相同的东西就拿过去又做了一次,他觉得岛津的在190-220区间没出现这个问题,但我没去看他最后的结果图。因为心里很不舒服。
另外,不只thf出现毛刺,二氯甲烷,和dmf都有毛刺现象出现,但出现的位置有不同,乙醇和水就比较好。
我觉得应该是截止波长的不同导致的,在截止波长以下的光完全被吸收了。但毛刺也太厉害了一点。



由此看来大概是热电的那台仪器的光学系统有问题了,造成紫外区的灵敏度变差所致。
jixf_1114
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多半还是溶剂末端吸收所致吧,氯仿的末端吸收液比较高的,二甲基亚砜就更加厉害了,到240还能有很强的吸收的,水和乙醇比较好应该能说明点问题了
Jehovah
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原文由 夕阳无限(anping) 发表:
原文由 scq123(scq123) 发表:
很奇怪,用热电evolution300做样品测试。
在参比和样品池中都加入THF基线校正后,参比和样品池仍然是THF进行紫外扫描发现在190-220nm范围内吸光度曲线不平,最高处吸光度有1.0。
但据说一样的情况在岛津的紫外里没有发生,很奇怪,谁能解释一下????


(1)样品室内仅放两支空的比色皿,然后做200~300nm波长区域的基线校正。
(2)将THF倒入样品杯中后进行扫描,观察THF的最大吸收峰在何处及峰值是多少?
(3)我推测这个THF试剂在紫外区的吸收值一定很高,这就是造成校正后的基线不稳的原因。
(4)岛津的仪器“据说”不会发生上述现象,但这只是“据说”而已,楼主亲自验证过吗?
(5)如果岛津的仪器确实可以做到校正基线很平坦,那么这两台仪器之所以会产生这样大的差别,其原因可能是检测器不同的原因。使用光电倍增管的仪器比使用光电二极管的仪器对于紫外区元素的灵敏度要高,故信噪比要好。楼主可以仔细调研一下各自仪器的检测器的类型便知了。


应该是浓度过高,本来氘灯在200nm以下能量就不高,而evolution300的灵敏度比岛津的底的原因(前者为光电二极管,后者我估计岛津的仪器可能是2450/2550型号,为PMT),造成噪声大。出现楼主所说的现象,楼主可以查看一下波长扫描时仪器的能量图就应该可以知道原因了。
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