主题：【极限体验】试用月旭后，不得不说。。。

结果与分析：
1.线性关系与最低检测限:
  分别取16种氨基酸质量浓度均为55.6mg/L、27.8mg/L、13.9mg/L、7.0mg/L和3.5mg/L的对照混合溶液，按照上述方法进行衍生，加入0.5g/L正亮氨酸内标溶液10微升，以各种氨基酸面积与正亮氨酸面积之比Y为纵坐标，氨基酸实际质量浓度X（mg/L）为横坐标，进行线性回归，得到的线性回归方程，r均大于0.99。当信噪比为2时，亮氨酸的最低检测限为0.56mg/L。
2.回收率：
  取样品，加入一定量的游离氨基酸标准品后，照前述方法进行衍生后进行测定，回收率均大于0.95.
3.衍生物存放条件：
  把标准品衍生后放置1、3、5、7、10天，进行峰面积对比。RSD小于2.0%。
4.以前3批样品结果对比：
  3批样品结果无差异。个别氨基酸（门冬氨酸、赖氨酸）差异较大。
5.色谱条件通用性比较。
  UltimateTM （XB-C18, 5um, 4.6×200mm）；waters氨基酸分析柱。结果对比发现分离度均大于1.0，月旭色谱柱在分离度上优于原waters氨基酸分析柱，分析认为月旭色谱柱长于waters氨基酸分析柱。
  理论塔板数均大于3000，而月旭色谱柱均大于5000。分析认为waters氨基酸分析柱为专用氨基酸分析色谱柱，可能更适合其专有的色谱条件。

相关说明：
1.本人已经离开原来做试验的公司，图谱没有办法弄上来。相关的数据是我笔记本写验证方案和报告留下来的，一大遗憾。
2.本人到了一家药物研究所，发现他们在购买岛津分析包，对比发现本质相同。Waters方法包他们也用过，但是和我以前的公司一样的感受就是价格太贵了。衍生包7000圆，色谱柱7500圆，衍生管1500圆，但是其衍生试剂开瓶后易水解，冰箱储存7天。
3.前几天，我同事聊天，他们还在用月旭色谱柱做氨基酸分析。开玩笑，改变呢方法后，每年为公司省去近3万的试剂开销，但是老板一点奖励都没有。赵本山大哥说的09年不差钱。

附：1-异氰酸萘酯衍生法测定24种氨基酸

一.        色谱条件：
1.        色谱柱：C18 (250MM*4.6MM)
2.        流动相组成：
A．        乙腈11ML+0.1MOL/L磷酸二氢钠2.5ML混合，用氢氧化钠液调至PH值为5.75，加水到100ML;
B．        乙腈60ML+0.1MOL/L磷酸二氢钠5.0ML，加水到100ML;
C．        甲醇12.5ML、乙腈2.5ML、磷酸盐缓冲液（0.1MOL/L磷酸二氢钠、0.1MOL/L醋酸钠液用磷酸调至PH值为5.4）4.5ML混合，加水至100ML；
D．        乙腈45ML、酸盐缓冲液（0.1MOL/L磷酸二氢钠、0.1MOL/L醋酸钠液用磷酸调至PH值为5.4）4.0ML混合加水至100ML
3.        梯度洗脱表
时间(MIN.)        A        B        C        D        其他
0~10                                        70%乙腈
10~40                        100%               
40~85                        100%               
85~160                                100%       
4.        流速：1.5ML/MIN；检测波长：222NM；进样量：2μl。
二．样品测定
1.一般用3.0%的高氯酸提取（氨基酸含量在2μmol,0.1ml），，内标物为正亮氨酸,用氢氧化钠中和并加入25μl硼酸缓冲液（0.1MOL/L硼酸用氢氧化钠调PH为6.25），再加入1-异氰酸萘酯125μl（2.5μl/ml丙酮液），45S后加环己烷1~2ML，漩涡混合10分钟，0.45μm膜过滤静置15分钟，取水层进样。
2.保留时间：20~150分钟内出峰顺序：
天门冬氨酸、谷氨酸、天门冬酰胺、丝氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸、组氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丙氨酸、精氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、内标物、苯丙氨酸、色氨酸、  胱氨酸、 半胱氨酸、  鸟氨酸、  赖氨酸
三．试剂与耗材
http://www.aladdin-reagent.com/thir.asp?Rea_SubID=15860阿拉丁试剂网
月旭品牌柱子
以上24种氨基酸分析的方法，我推荐给我一个同学在使用，主要做保健食品氨基酸测定。

介绍的很详细，学习了。

介绍的比较详实，谢谢分享

太好了,真是不错:

精密量取上述对照品和供试品溶液1ml,置试管中,加入A溶液0.5ml,B溶液0.5ml,摇匀,在50±1℃水浴中加热45分钟,取出.加入C溶液1ml,振摇，并用孔径为0.45μm有机膜过滤,放置30分钟后,取澄清的下层液进行分析试验。

既然已经过滤,为何需要放置30分,而且取上清液,难道过滤后还有沉淀物?

LZ困了，俺不困，请继续

PITC法氨基酸测定方法验证
产品简介：产品就是人脑有问题拿猪脑来补一下，因为里面含有多种氨基酸，什么18种，24种具体我也没有数过，附带什么活性小肽等。。。有无效果，因为我脑子还能运行，没有用过，所以效果就不知道。
方案目的：就是替换方法，检验合格好发货，老板在叫啊。。。
这什么产品？脑铂金脑黄金？

原文由 闲鹤野云(ruojun) 发表:
太好了,真是不错:

精密量取上述对照品和供试品溶液1ml,置试管中,加入A溶液0.5ml,B溶液0.5ml,摇匀,在50±1℃水浴中加热45分钟,取出.加入C溶液1ml,振摇，并用孔径为0.45μm有机膜过滤,放置30分钟后,取澄清的下层液进行分析试验。

既然已经过滤,为何需要放置30分,而且取上清液,难道过滤后还有沉淀物?

上面为油层，下层为水层。我们需要下层做分析。

原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
PITC法氨基酸测定方法验证
产品简介：产品就是人脑有问题拿猪脑来补一下，因为里面含有多种氨基酸，什么18种，24种具体我也没有数过，附带什么活性小肽等。。。有无效果，因为我脑子还能运行，没有用过，所以效果就不知道。
方案目的：就是替换方法，检验合格好发货，老板在叫啊。。。

“产品就是人脑有问题拿猪脑来补一下”这句话经典啊哈哈哈。。。。太搞笑了