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液相色谱（LC）
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主题：【求助】柱后衍生的原理及操作步骤

浏览0 回复9 电梯直达
qingxin_0926
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发表于：2010/03/11 21:45:52 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大侠，有没有人有液相色谱柱后衍生的原理以及操作步骤的？急用
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2010/3/11 21:54:11 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
要有柱后衍生设备才行，衍生的原理都是一样的。
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柏坡
hgycook
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2010/3/12 0:14:29 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
waters的有柱后衍生，以前用一次好像有个单独的泵。
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有水有渝
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2010/3/12 10:11:17 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
要有一个单独的泵用来输送配制好的衍生试液。
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qingxin_0926
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2010/3/12 11:35:05 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xky0230699(xky0230699) 发表:
要有一个单独的泵用来输送配制好的衍生试液。

我们与液相链接的是一个带有双泵的，我看有三个试剂瓶，那两个装什么液体，液相的流动相吗？
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qingxin_0926
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2010/3/12 11:38:18 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xky0230699(xky0230699) 发表:
要有柱后衍生设备才行，衍生的原理都是一样的。

你好，具体的柱温度，流速的调制在哪里，液相色谱的工作站上有吗？还需要调那些东西啊？我初次使用也没有操作说明书，不知道该怎么做，请赐教，谢谢
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pussyman
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2010/6/1 17:37:36 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你找到 了吗。我也需要
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寒江雪
zxfisher
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2010/6/3 15:10:36 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
HPLC柱前衍生和柱后衍生

1、为什么要衍生？
衍生化最为主要的目的就是提高目的物的可检测性。对于GC来讲，多数是为了增强目的物挥发性或者改善目的物极性；对于HPLC来讲多数是为了提高检测器对目的物的相应。
2、衍生化分类：柱前衍生和柱后衍生。柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应，反应产物在分析柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物；柱后衍生是分离物在分析柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，在柱子中分离的是目的物，在检测器处检测的衍生产物。
3、适用的化合物：生物酸/碱、胺类、抗生素（聚醚类抗生素多见）和氨基酸类。
4、衍生化要求？
1）衍生剂必须过量且稳定；不过量反应不完全，检测不充分。不稳定，重现性差。
2）衍生物、衍生产物和衍生副产物至少是好分离的。当然如果只能检测到衍生产物最好。
3）衍生反快速完全。反应慢，柱前衍生还可以，但柱后不行。因为流速固定，衍生池管路长度一定，留给衍生化的时间是一定的。柱前衍生可以在系统外等衍生完毕后进样，但也是影响效率的。
5、两种衍生比较
柱前衍生优点是，对设备要求不高，可以手工衍生，而且对衍生时间要求相对宽泛。缺点是，引入了过多的物质，如：衍生剂、衍生产物（当然这个是检测需要的）和衍生副产物，对柱子有潜在的负面影响，另如采用手工衍生也会引入过多的认为因素。
柱后衍生优点是，重现性好，认为因素少，引入物质比较少。缺点是，可能有扩散问题，在柱子中分离结束后，就存在扩散，如果衍生慢（必然流速低）、管路长扩散问题就会比较严重，再有就是要求有一套外源的泵系统和一个检测池，对于设备要求较高。
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2010/6/3 15:40:02 Last edit by xky0230699
有水有渝
xky0230699
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2010/6/3 15:41:14 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 pussyman(pussyman) 发表:
你找到 了吗。我也需要


要知道设备的具体型号，或者可以联系售后工程师看看能不能给你一份电子版的说明书。
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starzjyzjy
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2010/6/3 15:50:54 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很简单的阿？衍生试剂配置好， 就设个流速，一般0.3-0.5ml/min,还有就设个反应温度就可以了阿。具体看你柱后衍生分析什么物质阿？
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