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主题：【分享】海德利森色谱装柱流程

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发表于：2008/08/22 10:38:46 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
海德利森色谱装柱流程
以填装5um 硅胶 4.6×250 分析柱为例
                           


1 连接装柱所需空压机和海德利森色谱装柱机 确保装柱机工作时机身稳固
2 称取填料3.0-3.5g （4.6×250 分析柱标准需要2.8g，经验3.2g比较合适）
3 用40-50ml异丙醇（或异丙醇与乙腈比例1：1）溶解填料 用玻璃棒搅拌均匀 后用超声波超3分钟 以确保其分散性
4 迅速将上述混合液倒入匀浆罐（尽量短时间内完成该工序并确保匀浆罐内无气泡） 如匀浆罐不满再用异丙醇（或异丙醇与乙腈比例1：1）补满  理想情况是不需要再补充异丙醇（或异丙醇与乙腈比例1：1）
熟练后可知需要多少原料 所需原料的梁与温度、填料溶解性有关
5 迅速将匀浆罐和柱子连接到泵上 以60MPA的压力 以甲醇（化学纯）做流动相开启装柱机 保持装柱机在60MPA压力下工作20分钟
6 减压至30MPA 运行5-10分钟 缓慢降压至系统无压力  静止3分钟
7 卸下柱子 看柱头部分是否平整 如不平整用美工刀铲平（很需要技术的步骤）
8 将柱子接入高效液相色谱仪 用甲醇（色谱级）以1.0流速运行30分钟
9 开始检验色谱柱效
10 多次熟练此工作 以提高装柱质量

备注：
1异丙醇（或异丙醇与乙腈比例1：1）至少分析纯
2甲醇 为控制成本可用化学纯 但事先需要经过0.2um 有机滤膜过滤
3工作开始前开启装柱机用流动相甲醇冲洗管路 尽量确保管路中无气泡

                                            北京海德利森科技有限公司.
                                              陈海涛  工程师
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2013/12/3 11:22:27 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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