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主题：【求助】求6-甲基尿嘧啶的LC方法

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yszhou
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发表于：2010/04/06 09:33:48 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有朋友做过6-甲基尿嘧啶的LC分析吗?请问流动相和波长分别是什么?C18可以分开吗?
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有水有渝
xky0230699
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2010/4/6 10:33:20 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以参考药典中的氟尿嘧啶。
参考附子中尿嘧啶含量：
附子—尿嘧啶的含量测定方法
色谱条件  色谱柱：Hypersil C18 (4.60mm×25 mm，5μm)分析柱；流动相：0.05mol/ L磷酸氢二铵溶液；流速：0.8mL/ min；检测波长：254nm；柱温：20℃。
对照品溶液的制备  精密称取尿嘧啶对照品，加蒸馏水制成0.012mg/mL的溶液。
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2010/4/6 10:33:33 Last edit by xky0230699
yszhou
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2010/4/6 16:08:04 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 欧冠+世界杯(xky0230699) 发表:
可以参考药典中的氟尿嘧啶。
参考附子中尿嘧啶含量：
附子—尿嘧啶的含量测定方法
色谱条件  色谱柱：Hypersil C18 (4.60mm×25 mm，5μm)分析柱；流动相：0.05mol/ L磷酸氢二铵溶液；流速：0.8mL/ min；检测波长：254nm；柱温：20℃。
对照品溶液的制备  精密称取尿嘧啶对照品，加蒸馏水制成0.012mg/mL的溶液。

100%水?不需要甲醇或者乙腈吗?
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yszhou
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2010/4/6 16:10:11 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能的杂质是4-甲基尿嘧啶,所以比较难分开,用什么样的梯度?谢谢指点!
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有水有渝
xky0230699
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2010/4/6 16:10:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
尿嘧啶实就是用于检测反相柱的死体积的，因为它的保留值很小，你加了一个甲基，建议可以从50甲醇试起。
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kylabs
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2012/1/31 17:42:52 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
尿嘧啶的LC分析方法，不是普通的C18柱
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kylabs
kylabs
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2012/1/31 17:43:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
Method Conditions



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Column Cogent Diamond Hydride™, 4µm, 100A
Catalog No. 70000-75P
Dimensions 4.6 x 75 mm
Mobile Phase DI Water + 0.1% Acetic Acid
Flow rate 1.0 mL/min.
Sample 1. Uracil
2. Guanine
3. Thymine
4. Adenine 
Injection Volume 2.5 µL
Detection UV 254 nm
Temp 25° C


Discussion

--------------------------------------------------------------------------------

This method is easy to prepare, use and reproduce. Note Excellent separation under 100% aqueous conditions with alternate selectivity. These bases are difficult to retain on columns with ordinary silica that contain significant amounts of silanols.

该帖子作者被版主 xky0230699加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励分享
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