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凝胶色谱（GPC）
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主题：【求助】凝胶色谱法分离蛋白质原理？

浏览0 回复4 电梯直达
muchonghh
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发表于：2010/04/20 15:49:48 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们学习分离血红蛋白时，书上提到凝胶色谱法分离蛋白质原理是蛋白质分子量大小不同导致有些蛋白质能进入凝胶颗粒，另一些不能，所以迁移速度不同，将分子量不同的蛋白质分离。既然这样，那为什么不是因为蛋白质分子大小不同呢？

问题补充：关键在于为什么是根据蛋白质分子量大小而不是蛋白质分子大小（所占空间）分离呢
小分子蛋白可以在小孔内穿过 从而增加了分离时所走的路程 最后被分离。大分子蛋白主要是通过凝胶颗粒之间的空隙通过 因此路线相对较短最先被分离。

只是做题时这一题选分子量而不选分子大小
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hmzhou83
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2010/4/21 17:40:12 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
准确说是依据蛋白质分子的空间大小,表观为分子量大小.你可以自己感觉一下,某蛋白粒径3nm,和某蛋白分子量60KD.那种表述更有对蛋白的感觉?
你到生命科学看看蛋白纯化.
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tigertooth
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2010/4/22 13:29:34 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得这个题出的有问题，或者说两种答案都没错。
GPC实现分离就是依靠空间体积的大小。对于同种物质，一般分子量和空间体积是对应的，即分子量大，粒径也必然大。现在国外基本上用SEC-尺寸排阻色谱来替代GPC的称呼，就是因为SEC更准确更形象一些。
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小不董
doxw0323
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2010/4/22 15:01:35 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一个高分子有链状的，也有支化很严重的，像星型的，如果分子量一样的链装分子和支化的分子，哪个的分子更大呢？
所以GPC测定的是相对分子量而不是绝对分子量。
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tigertooth
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2010/4/23 11:39:17 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
蛋白质是比较特殊的一类样品
1，一般都是球形的，但即便是球形的紧密程度也不一样。
2,二聚或再大的聚集体，虽然分子量变化很大，但粒径变化可能不大。对于半径10纳米，一般的高分子和多糖什么的，分子量可能在10万左右，但蛋白可能分子量上百万。
3，蛋白质是聚电解质，所以可能由于电荷的作用，分子量大的可能后出峰。
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