主题：【转帖】HPLC分析方法开发中流动相调整。

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原文由 yongw(yongw) 发表:

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我用UPLC时，感觉只有楼主所说的一半。

没有过UPLC，问问快乐：UPLC一般分析样品基本上都是在10分钟以内出峰吗？流速都是低流速吗？柱子有多长？液相都是两元泵吗？

基本上3min全出完了。

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我用UPLC时，感觉只有楼主所说的一半。

没有过UPLC，问问快乐：UPLC一般分析样品基本上都是在10分钟以内出峰吗？流速都是低流速吗？柱子有多长？液相都是两元泵吗？

基本上3min全出完了。

溶剂峰会不会影响你的目标成分

原文由 yongw(yongw) 发表:

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原文由 yongw(yongw) 发表:
东风讲的用到了3倍规则
但是应用更多的是刚开始时走个梯度，根据梯度结果计算等度条件

是指刚开始摸条件时，都是利用梯度，最后才等度，是吗？

对，就是这个思路
走一针梯度，等度就知道给大概，然后再确定具体的等度比例

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东风讲的用到了3倍规则
但是应用更多的是刚开始时走个梯度，根据梯度结果计算等度条件

是指刚开始摸条件时，都是利用梯度，最后才等度，是吗？

对，就是这个思路
走一针梯度，等度就知道给大概，然后再确定具体的等度比例

我的思路与yongw是相反的，我一般是先走等 度，再走梯度。

原文由 lxx5052(lxx5052) 发表:
看来以前没有遵循这个方法，能分离好就行，呵呵，这下知道规则了，非常感谢楼主！

原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
方法 1：  由强到弱：  一般先用 90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)
进行试验，  这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整
有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。
方法 2  三倍规则  ：每减少 10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留
因子约增加 3 倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调
整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。
方法 3  粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂 10%的改
变量调整为 5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情
况不再改变。
先 100%的有机溶剂，在降下来。因为有些分离 96%即可分离
http://www.westyx.com/bbs/read.php?tid=60504&fpage=13

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:

原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
方法 1：  由强到弱：  一般先用 90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)
进行试验，  这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整
有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。
方法 2  三倍规则  ：每减少 10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留
因子约增加 3 倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调
整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。
方法 3  粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂 10%的改
变量调整为 5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情
况不再改变。
先 100%的有机溶剂，在降下来。因为有些分离 96%即可分离
http://www.westyx.com/bbs/read.php?tid=60504&fpage=13

楼主，我做过的很多例子似乎是二倍规则啊

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:

原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
方法 1：  由强到弱：  一般先用 90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)
进行试验，  这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整
有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。
方法 2  三倍规则  ：每减少 10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留
因子约增加 3 倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调
整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。
方法 3  粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂 10%的改
变量调整为 5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情
况不再改变。
先 100%的有机溶剂，在降下来。因为有些分离 96%即可分离
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楼主，我做过的很多例子似乎是二倍规则啊