原文由 cheng7692(cheng7692) 发表:
我是PTI的用户,总体感觉还是不错,现在有几个问题想请教
(1)IRF的测定对lifetime影响大吗?我的理解是对一种浓度的ludox,在特定激发下的IRF intensity是一样的,但不同的测量样品间的最大intensity可能不一样,在这种情况下,我的IRF是以最强的那个样品的intensity为参照,还是有其他要求?此外,控制IRF推荐的方法是用ND filter,但我们没有ND,可不可以配置不同浓度的ludox以最接近样品intensity来代替?
(2)对于inner filter effect,我们曾采取PTI推荐的用triangle的皿,即所谓的right angle,但是那种皿很容易坏了(我们的4个1w多块买的,不到半年就坏了),可不可以用一般的front face 的皿,然后调节样品台到60度,即所谓的magic angle。
(3)我们原来的strobe没有polarizer,最近打算自己配两个手动的glan thompson的自己装,在安装时有什么需要特别注意的吗,比如校准之类的?我的理解是只有laser穿过polarizer就可以了,对吧。
实在不好意思,这么多问题,也不知PTI的高人能看到不,或者其他用过PTI的朋友能帮忙解释一下。
在这里再表扬一下PTI,真是不错的说。
cheng7692 兄, 您好
不好意思,这段时间一直在外出差,今天才看到贴子,希望没有耽误您的事情, 我的邮件是:
jack.zxd@chansn.com 请和我联系,等我们联系上了,有机会我会去您实验室拜访。
对你上面提到的问题,我初步答复如下:
1) IRF对寿命低于100ns的lifetime测量会有比较大的影响,我们的IRF的半峰宽度在1ns秒左右,如果荧光寿命为10ns, IRF将在其中占据10% ,对最终结果影响太大了,如果荧光寿命高于100ns, IRF在其中的影响不到1%,可以忽略。所我们建议用户低于100ns的寿命要做IRF,以提升结果精度,高于100ns的寿命则可以不做IRF。
在寿命的拟合中,IRF的强度并不重要,主要是和IRF曲线形状有关,因此不必追求IRF的强度与衰减曲线完全相同,差不多就行,当然为了好看,你可以对IRF的强度进行调整。
IRF的测量条件要求与当前样品的测量条件完全相同(狭缝宽度、积分时间等等),因此应该对每个需要IRF的样品都单独进行IRF测量,而不是不同样品混用一个IRF。
用Ludox来测量IRF是个不错的选择,可以调制不同浓度的Ludox来达到一个合适的强度,但这样做比较麻烦,最好还是有ND会比较方便此,国内的ND会便宜不少,采购一套比较好。
2) 对于Inner Filter Effect, triangle cuvette 是个不错的选择,只是用的时候要小心,您半年就坏4个也算难得了,(可以称为triangle cuvette killer :-) ) 您说front face 皿是什么样的,如何放在样品架上,还能调整角度? 我不太清楚,你有照片可以发个上来吗?
3) 对于Polarizer, 我觉得您自己做会有很大难度,不过如果实验精度要求不高,可以自己尝试一下,校准会比较困难。我推荐您采购PTI原产的手动Polarizer,这样会比较好。
以上说明请您参考,请尽快与我联系,方便交流。
jack.zxd