主题:【第三届原创参赛】掰掰我的一次凝胶过滤层析初步分离金属硫蛋白

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ahuadicp
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1.楼主文章写的很好,逻辑非常好,学习了。有好东西继续分享。
2.有一个问题,"金属硫蛋白中不含有芳香族氨基酸,所以在紫外不能形成280nm特征光谱",这个原理好理解。"金属硫蛋白在二级结构中形成特征性的巯基金属簇,而导致在紫外光谱中出现对应于金属簇结构的特殊吸收峰,吸收峰的位置主要决定于金属的种类,如:镉硫金属簇的吸收位于250nm附近,而锌硫金属簇的吸收峰位于225nm附近." 这个是个什么原理?请教下楼主了,我不懂。
3.提个建议,我觉得在紫外扫描图的话,是不是应该贴几张你处理样品的空白体系的图谱,这样就更有说服力了。
quin
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杭州瑞析
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不错 这是个经典的文章
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2010/8/6 11:40:17 Last edit by carollee
congcong
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原文由 ahuadicp(ahuadicp) 发表:
1.楼主文章写的很好,逻辑非常好,学习了。有好东西继续分享。
2.有一个问题,"金属硫蛋白中不含有芳香族氨基酸,所以在紫外不能形成280nm特征光谱",这个原理好理解。"金属硫蛋白在二级结构中形成特征性的巯基金属簇,而导致在紫外光谱中出现对应于金属簇结构的特殊吸收峰,吸收峰的位置主要决定于金属的种类,如:镉硫金属簇的吸收位于250nm附近,而锌硫金属簇的吸收峰位于225nm附近." 这个是个什么原理?请教下楼主了,我不懂。
3.提个建议,我觉得在紫外扫描图的话,是不是应该贴几张你处理样品的空白体系的图谱,这样就更有说服力了。


谢谢您的肯定与鼓励!!

"金属硫蛋白在二级结构中形成特征性的巯基金属簇,而导致在紫外光谱中出现对应于金属簇结构的特殊吸收峰,吸收峰的位置主要决定于金属的种类,如:镉硫金属簇的吸收位于250nm附近,而锌硫金属簇的吸收峰位于225nm附近." 这个是个什么原理?


其实指的就是在蛋白质的二级结构中有不同的巯基金属簇结构,受到此类结构域的影响,根据金属簇中的技术种类不同而检测的吸收峰值不同,具体的数值只能通过实验来检测摸索~~~~这个结论的原理也是基于实验的,相关的文献也有很多,建议您可以查看下!!

提个建议,我觉得在紫外扫描图的话,是不是应该贴几张你处理样品的空白体系的图谱,这样就更有说服力了。


这一点您提醒的极是啊!!!谢谢您!!
小不董
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楼主说的:
聚丙烯酰胺是以丙烯酰胺和甲撑双丙烯酰胺聚合而成的具有三维网状结构的凝胶,其孔径可调,性质稳定,无色透明。用聚丙烯酰胺凝胶作为电泳的支持物分离蛋白,具有分辨力高、酶活性影响小、显带效果好等优点,因此应用广泛。
这段话是什么意思,和文章有什么关联?
柱子的填料用的是聚丙烯酰胺凝胶?这个凝胶是买的现成商品吗?装填的时候还需要注意什么?比如装填的凝胶选型和凝胶是否需要处理等细节。
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2010/8/3 19:58:52 Last edit by doxw0323
congcong
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原文由 小不董(doxw0323) 发表:
楼主说的:
聚丙烯酰胺是以丙烯酰胺和甲撑双丙烯酰胺聚合而成的具有三维网状结构的凝胶,其孔径可调,性质稳定,无色透明。用聚丙烯酰胺凝胶作为电泳的支持物分离蛋白,具有分辨力高、酶活性影响小、显带效果好等优点,因此应用广泛。
这段话是什么意思,和文章有什么关联?
柱子的填料用的是聚丙烯酰胺凝胶?这个凝胶是买的现成商品吗?装填的时候还需要注意什么?比如装填的凝胶选型和凝胶是否需要处理等细节。


因为我进行电泳检测所使用的就是聚丙烯酰胺,在这里是说明为何选择它进行电泳!
这个是电泳检测使用的不是柱子里面的填充物
mll2020
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