主题:【分享】色谱柱介绍-YMC-BioPro 系列离子交换柱

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儒雅凤
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YMC-BioPro系列是适用于各种蛋白质、核糖类分离的最佳离子交换柱,并对非特异吸附极小的亲水性聚合物引入了强阴离子/强阳离子的交换基。
本系列拥有高分离、高吸附量的多孔型和最适合于超高速分析的无孔型型号。

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一)产品特点
1) 采用新开发的亲水性聚合物基材,使得蛋白质的非特异吸附降至极低;
2) 具有能最大限度地与官能团相互作用的表面结构;
3) 通过最紧密的填装技术,实现了以往没有的高理论塔板数和优秀的峰形对称性;
4) 有引入了第4级氨基(QA)的强阴离子交换体和引入了硫代丙基(SP)的强阳离子交换体供选择;
5) 有对于少量制备也非常有效的高动态吸附量、高回收率的多孔型(Porous Type);
6) 有专门为超高速•高分离分析设计的无孔型(non-Porous Type)。
二)产品规格
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三)高理论塔板数和优秀的峰形对称性

1. 核糖核酸酶A
2. 细胞色素C
3. 溶菌酶
从上图可见:
1)在蛋白质分离中,市场上销售的色谱柱的拖尾情况较明显,与此相反YMC-BioPro SP-F则显示出没有拖尾的良好峰形特性。
2)另外,尽管填料的颗粒很大,但依然可以得到较高的理论塔板数。
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四)DBC检测过程
检测前,采用平衡缓冲液平衡色谱柱。主要分三步完成。具体过程见下图及说明。

1)上载:将已知浓度蛋白质溶液在要求流速下持续上载至洗脱液吸光度达到饱和。
2)清洗:用平衡缓冲液清洗柱子至没有蛋白洗脱。
3)洗脱:DBC工具是检测应用的蛋白质溶液容量到一个确定突破点的方案。
儒雅凤
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多孔型YMC-BioPro QA/YMC-BioPro SP系列离子交换柱不仅具有良好的分离能力和高动态吸附容量及回收率,且即使对少量精炼也非常有效。
· 良好的分离能力

图中:1. 核糖核酸酶 A (0.5mg/mL);2. 细胞色素 C (0.5mg/mL);3. 溶菌酶 (0.5mg/mL)
上图中采用市场上销售的多孔型聚合物阳离子交换柱与YMCBioProSP对蛋白质的分离进行了比较,可知YMC-BioPro SP具有优秀分离能力,且对杂质较多样品也同样有效。

下图中采用YMC-BioPro QA与市场上销售的阴离子交换柱分析人体血清中的蛋白质和牛血清白蛋白的胰蛋白酶,体现了YMC-BioPro QA具有优秀分离能力。
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高动态吸附容量及回收率
YMC-BioPro是以非特异吸附极小的、亲水性聚合物作为基材的离子交换柱,并具有与蛋白质容易相互作用的表面结构。为此,对于蛋白质显示出高动态吸附容量和回收率。
BSA的动态吸附容量及回收率


高吸附能力
1)大量负荷中的分离能力

2)Trypsin inhibitor的回收率
儒雅凤
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无孔型YMC-BioPro QA-F/YMC-BioPro SP-F系列离子交换柱实现了最小限度的压力损失和高分离能力,具有对于超高速分析十分有效的30mm柱及具有极高分离能力的100mm柱。
· 蛋白质的超高速分析

图中:1. 核糖核酸酶A;2. 细胞色素C;3. 溶菌酶
上图比较了无孔型柱与多孔型柱的蛋白质分离。由于YMCBioPro无孔型柱基材的机械强度高、柱效高,因此适合于提高流速的高速分析。

· 蛋白质的高分离分析

图中样品:抗人体lgG4单克隆抗体(Mab)
上图可见:对于用DEAE色谱分离法提取的市场上销售的单克隆抗体,用YMC-BioPro QA-F的长度为100mm的柱分析不同批次的样品,发现各批次均出现了多个峰形,根据批次获得了不同的色谱。由于YMC-BioPro QA-F及SP-F的长度为100mm柱,具有极高的分离能力,因此能有效地分离抗体等各种糖蛋白质分子,并适用于生物医药的品质管理。

· 核酸的高分离分析

样品:DNA片段1kb DNA ladder(75-12,216 bp)
上图可见:采用长度100mm和30mm柱来比较DNA片段的分离。可见具有高分离能力的YMC-BioPro QA-F的100mm长柱,对核酸的高分离分析十分有效。
huaibeijiayuan
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huaibeijiayuan
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如果liwei7893版主使用过这种色谱柱,可以结合自己的使用经历写一篇原创了
小卢
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原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:
如果liwei7893版主使用过这种色谱柱,可以结合自己的使用经历写一篇原创了


有道理!
richies
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