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液质联用（LCMS）

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主题：【讨论】做过克伦特罗的版友请进来指教！

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coffee8

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发表于：2010/08/26 09:48:20 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

看到版面内有几个有关克伦特罗检测的帖子，所用的方法也有好几个，感觉乱糟糟的！
我是新手，刚开始准备用液质做克伦特罗，不知道该选择哪个方法比较好。
好像版友讨论的说如果只做克伦特罗可以不加酶，用外标就行是不是呀？
开始阶段我们想先从简单的开始，处理方法尽量简单一些，循序渐进
不知道各位做过这个项目的版友，有没有什么好的建议呀！
说说你的经验吧！十分感谢！

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2010/8/26 11:15:57 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 coffee8(coffee8) 发表:
看到版面内有几个有关克伦特罗检测的帖子，所用的方法也有好几个，感觉乱糟糟的！
我是新手，刚开始准备用液质做克伦特罗，不知道该选择哪个方法比较好。
好像版友讨论的说如果只做克伦特罗可以不加酶，用外标就行是不是呀？
开始阶段我们想先从简单的开始，处理方法尽量简单一些，循序渐进
不知道各位做过这个项目的版友，有没有什么好的建议呀！
说说你的经验吧！十分感谢！

俺也没有做过, 不过发现有关资料, 希望对你有帮助.
http://www.uscnlife.cn/web/page/news4112.htm

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coffee8

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2010/8/26 11:22:03 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

高效液相色谱法测定克伦特罗残留

(1)试剂和材料
①盐酸克伦特罗标准品
②乙醚；分析纯
③正己烷：分析纯
④甲醇：色谱纯
⑤盐酸克伦特罗标准液
⑥lmol／I。盐酸溶液
⑦0.05mol／L乙酸缓冲液
⑧0.3mol／L乙酸缓冲液
⑨lmol／LNaOH溶液 ’
⑩甲醇液：甲醇—重蒸水(75+25)
(2)仪器和设备
①高效液相色谱仪
②匀浆机
③旋转蒸发仪
④电子天平：感量0.00001g
⑤紫外分光光度计
⑥离心机
⑦Silioa小柱
⑧AluminaA小柱
(3)测定步骤
①提取和净化取组织样品10g，加入30ml lmol／L盐酸溶液匀浆，超声波振荡3h，5000r／mln的速度离心10min，—上清液用lmo]／LNaOH溶液滴至碱性，乙醚或正已烷抽三3次，抽提液在水浴锅上蒸发至5ml后上Silioa小柱，以除去大部分杂质，洗脱液上Alu—mina A小柱，将待测成分吸附在小柱上，用0.05mol几乙酸缓冲液(pH7.0)洗涤小柱3次，0.3mol／L乙酸缓冲液洗脱待测成分，冷冻干燥，用0.5ml甲醇液溶解后取100uL供高效液相色谱仪检测。
②测定
a．色谱条件
色谱柱：C18柱，150mmX6.Omm(1
流动相：甲醇—水(75+25)
流速：0.65ml／min
检测波长：243nm
进样量：100uL
b．色谱测定分析样品按上述仪器操作条件供高效液相色谱仪分析。
③空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。
(4)检测限和回收率
本方法在猪的肌肉和肝脏组织中的检测限为0.001ug/g’回收率范围为80％±20％

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2010/8/26 11:24:39 Last edit by coffee8