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主题：【第三届原创大赛】日立L-8900氨基酸分析仪新手上路之心得一二

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dfldxt
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发表于：2010/09/07 11:20:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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以前一直做液相、液质之类，最近被老板派了个新任务，做氨基酸分析仪。好在有工程师培训上手，不至于自己啃说明书。到现在，用了也有两个月了吧，跟大家分享一下心得吧，也不知道放在液相版是否合适，要用好一台仪器真的没有那么容易。

总的来说，日立L-8900氨基酸分析仪如果运转正常的话，其实还是挺方便的，首先不需要做柱前衍生，据说那种反应率只有50%，这个就直接茚三酮在线衍生了，其次，检测方法比较固定，比如水解蛋白的氨基酸检测就用一个53分钟的程序，前30分钟出完所有峰，后面20分钟系统自动清洗，所有样品做完之后系统就自动进入清洗程序，洗完之后自动停泵。我觉得这个蛮好的，不用像以前做液相的时候还要计算好时间。

当然，问题还是接踵而来。最初买仪器的时候，里面的缓冲液和反应液都是原装的，很好用也很贵，大概做了100个样品左右某些缓冲液和反应液就用完了，需要自己配制。我首先配的是其中一种反应液，说明书里面也有配方和配法。配好了之后，刚开始还好，做了一两天样品之后，泵压就开始上升，以前压力不到1MPa，慢慢就升到2 MPa、3MPa。由于这仪器的保护机制太强大，泵压超过了设置就会自动停机清洗，于是有那么两次等我发现的时候机器已经停机清洗半天了。打电话给维修工程师求助，让我把设置泵压稍微调高一点，可是进样时压力还在继续升高，只好再次求助。这回工程师让我泵头前面的流路过滤器拆下来超声，先是用水，后来改用甲醇和乙醇，同时把反应液再次过滤，结果还是一样，开始时压力降下来了，可是随着做样的进行，压力再次攀升。焦头烂额中，我请教了一位应用经验丰富的工程师，原来压力大的原因是跟反应液的配法有关，说明书上写的是用醋酸锂，实际上应该用醋酸钠，前者就是会造成压力大。之后我重新配了反应液，现在泵压很正常，基本不会超过1MPa。据说是说明书上的内容比较老，很久也没有更新，所以还是要多跟工程师交流。

泵压是降下来了，但是时间一长，反应液会降解，这样我做样品时响应值也跟着降了。以前是没有这问题的，说明我的试剂质量有问题，试剂的过氧化物含量、含水量等诸多指标都会影响。现在我还没有解决这个问题，想要选择一种质量符合要求，且价格合适的试剂，还真没有那么容易。

接下来又要配缓冲液，还是照着说明书里的配方，做样的时候发现基线跑不平了，工程师说这跟试剂的品级有关系，尽量用优级纯以上的试剂。不过国产试剂的质量还是有待提高，加上缓冲液中试剂的种类比较多，虽然我大部分用的是优级纯的试剂，基线还是不理想。我接下来要慢慢试验了，看看究竟是哪种试剂影响了我的基线。

啰啰嗦嗦讲了这么多，其实归结起来，氨基酸分析仪自动化程度高，但是对里面的缓冲液和反应液要求还是比较高的，应该尽量用品级高的试剂，如果有条件用进口试剂的还是要用，还有配制是一定要用超纯水，我自己是用的娃哈哈纯净水。这里要特别感谢天美公司的吕工，之前关于应用请教了他很多，他每次都非常耐心的给我讲解，对我帮助很大，尤其是我周围完全没有熟悉氨基酸分析仪的人。新手上路，感觉是在跌跌撞撞中前进，如果有跟我一样初用氨基酸分析仪的人，希望我的心得能给他们一点帮助。
上图一张，看看效果如何，氨基酸分析仪外观
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有水有渝
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2010/9/7 12:39:41 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸分析仪与普通液相有什么区别，与带柱后衍生的液相色谱又有什么不现，氨基酸分析仪可否用于其它物质的检测，你觉得是氨基酸分析仪的分析成本高，还是柱前衍生的分析成本高，柱前衍生现在方法也比较成熟了，甚至一些药品标准，如氨基酸注射液都应用了柱前衍生法。
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dfldxt
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2010/9/7 14:38:54 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做这台仪器之前我基本上没做过氨基酸检测，我的理解是氨基酸分析仪应该类似于楼上说的带柱后衍生的液相色谱，它通过离子交换柱分离各种氨基酸，然后通过茚三酮反应完成检测。柱前衍生我没做过，但是我听说衍生试剂也比较贵，反应率只有50%，至于哪个成本高自己没做过也不敢妄下结论。
氨基酸分析仪应该适用于专门做氨基酸检测的单位，一般不用于测其他物质，在氨基酸检测方面我还是新手，希望跟各位多交流学习
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happy美丽
dyann
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2010/9/7 15:04:04 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
当初购买日立仪器的时候，工程师几乎是把仪器拆散了给我们讲解，并且鼓励我们自己动手安装一些零件。
从这一点来看，天美的工程师的确比较有耐心，售后服务也很不错，要是所有品牌的工程师都能做到这样就好了。
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2010/9/7 15:11:30 Last edit by dyann
有水有渝
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2010/9/7 15:04:18 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议楼主上几个图片，比较氨基酸分析仪与普通液相色谱的硬件，整理后可以参加原创大赛。
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cctv2008
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2010/9/8 8:58:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸分析的方法一直不成熟，定性可以，定量就不可靠，所以氨基酸含量测定数据准确性？？？？
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给力芬
huojuncai
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2010/9/8 9:33:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
建议楼主上几个图片，比较氨基酸分析仪与普通液相色谱的硬件，整理后可以参加原创大赛。


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dfldxt
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2010/9/8 11:26:14 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天拍照了，等会有空就写
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dfldxt
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2010/9/8 11:28:01 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cctv2008(cctv2008) 发表:
氨基酸分析的方法一直不成熟，定性可以，定量就不可靠，所以氨基酸含量测定数据准确性？？？？


我觉得仪器本身的重现性还可以，定量的误差还是来自于前处理，我目前做这方面也在探索中，感觉某些实验条件需要优化
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快乐
ynsfeed
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2010/9/8 13:23:56 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸分析仪的柱子也特贵。
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edwarz
edwarz
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2010/9/8 16:01:27 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我单位的L-8800两个泵的压力传感器坏了，打款过去三个多月还没到货，晕。建议各位在买设备时多买点耗材，天美氨基酸分析仪的配件到货是很慢的
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