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液相色谱（LC）
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主题：【原创】液相色谱操作流程

浏览0 回复8 电梯直达
fobhcff
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发表于：2010/09/28 16:55:09 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
液相色谱操作流程

我们制定机器的操作规程，不仅是规范我们的操作，也是为了对机器的保护，换句话说，机器也有一个适应，我们长时间按习惯来操作，那么我们的机器寿命会大大加强。

1、开机，不同的机器会有不同的识别路径，我用的日立的机子，如果你先开色谱，在开电脑主机，它是不会识别的，所以根据不同的牌子我们采取不同的开关机顺序，我每次开机和关机总是相反的过程，开机：电脑主机—显示器—组织器—泵—自动进样器—柱温箱，为什么没写检测器？那是因为我们开机完成后要平衡大约两个小时，这段时间没有必要开，同时也可以延长氘灯的寿命。

2、排气，这一步是非常重要的，不管你是否将溶剂过滤头拿离液面，排气没有特别的规定，我觉得以2分钟左右为宜，太短起不到应有的效果，太长浪费我们的流动相。

3、冲洗色谱柱：色谱柱一般保存在有机溶剂当中，处于静态，突然要改变状态运动起来，其中组分必然发生变化，我们为了降低其产生的影响，刚开始应以小流速为宜，如0.5ml/min—0.8ml/min—1mo/min依次递增。此处可以理解为我们开车同样的道理。有好多人认为，流动相组成发生变化不会影响到柱子，我个人认为这种认识是错误的，大家想我们从秋天慢慢过渡的冬天生理生理上不会有太大反应，可是如果从夏天呢？所以我认为从有机溶剂到流动相的过渡应至少经历3次组成变化如：100%甲醇—65%甲醇水—30%甲醇水—10甲醇水—流动相。

4、平衡：刚开始接触液相时，工程师特别强调基线必须平稳才可做样，我们铭记在心，对么？现在看来不完全对，平衡的时候我们要看检测器了，看完后，因为灯也要预热必然出来的基线不平，我们只能眼睛盯着显示器看看，其实不必这样，我们可以让标样走两针，这个时间来平衡柱子已经绰绰有余了。

5、收尾：以3—2—1的步骤就没错了。

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vergil
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2010/9/28 22:18:05 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
组织器—泵—自动进样器—柱温箱还有检测器等这些部件的开机顺序有没有一定要求，我也想知道这个问题！
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liuliuhui
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2010/9/29 0:10:43 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平衡为什么用两个小时的时间？
好像有点长
我们一般情况下只平衡30分钟
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〓猪哥哥〓
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2010/9/29 0:11:10 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是楼主原创的吗？参加原创比赛？
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marchingon
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2010/9/29 2:48:23 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大致都是一样的，只是时间控制稍有不同
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青林
wyqql2060
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2010/9/29 21:43:01 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们也是两个小时的平衡时间,对柱子比较好的保护
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fengxuejiao
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2010/10/6 16:19:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们就平衡半个小时左右耶，是不是对柱子不好啊
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雪妖
czj_1027
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2010/10/6 17:58:11 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 fengxuejiao(fengxuejiao) 发表:
我们就平衡半个小时左右耶，是不是对柱子不好啊


这个平衡时间的长短对色谱柱没有什么关系的

一套完整的平衡，包括运行分析程序，包括进样，得到稳定重现的峰面积保留时间等
我一般不会死等着基线平，一般冲5个柱体积左右，我就开始进样了，开始的时候可能不好，但是运行样品的分析程序可以加快系统的平衡，特别是检测大分子量的物质时，单跑流动相，基线平了，开始的进样也不一定就好
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头像更新中，请稍候…
kaikaifeng
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2010/10/6 20:33:44 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉排气就一步，不是特别重要~
一般情况下也不会进气泡的，呵呵~
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