现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中。但是色谱填料的选责范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。
一. 硅胶基质填料 1, 1, 正相色谱
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团
(ZH
2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform) 二氯甲烷(Methylence Chloride)等.
2反相色谱
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对教弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性教强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性教强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS) C8(MOS)。C4(B)C
6H
5(Phenyl)等。