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主题：【求助】多糖分子量分布GPC柱子的选择问题

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bonly10

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发表于：2010/10/16 20:46:49 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位大虾，请教一下多糖分子量分布GPC柱子的选择问题，我想做香菇多糖的分子量分布，对照的分子量分别为10000,21400,41100,133800和2000000，样品的分子量大约为40~50万，请问我选择OHpak SB-803HQ 的柱子合适吗？
我在网上查了一下，它的排阻限是 100,000，粒径是 6um，规格I.D.×L（mm） 8.0 x 300。
还有这里的排阻限是什么意思啊，是指能通过该柱子的最大分子量吗？多糖的分离与填料的粒径有何关系啊？

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2010/10/17 18:22:47 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

直接联系各大ＧＰＣ柱的代理商，把你的情况反应一下，让他们帮你选择一根合适的色谱柱，然后你再比较一下各家的性价比。
凝胶的选择根据实验目的不同选择不同型号的凝胶。如果实验目的是将样品中的大分子物质和小分子物质分开，由于它们在分配系数上有显著差异，这种分离又称组别分离，一般可选用SephadexG-25和G-50，对于小肽和低分子量的物质（1000-5000）的脱盐可使用SephadexG-10，G-15及Bio-Gel-p-2或4.如果实验目的是将样品中一些分子量比较近似的物质进行分离，这种分离又叫分级分离。一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶，层析过程中这些物质都能不同程度地深入到凝胶内部，由于Kd不同，最后得到分离。

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bonly10

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2010/10/18 18:46:31 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
直接联系各大ＧＰＣ柱的代理商，把你的情况反应一下，让他们帮你选择一根合适的色谱柱，然后你再比较一下各家的性价比。
凝胶的选择根据实验目的不同选择不同型号的凝胶。如果实验目的是将样品中的大分子物质和小分子物质分开，由于它们在分配系数上有显著差异，这种分离又称组别分离，一般可选用SephadexG-25和G-50，对于小肽和低分子量的物质（1000-5000）的脱盐可使用SephadexG-10，G-15及Bio-Gel-p-2或4.如果实验目的是将样品中一些分子量比较近似的物质进行分离，这种分离又叫分级分离。一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶，层析过程中这些物质都能不同程度地深入到凝胶内部，由于Kd不同，最后得到分离。

首先感谢版主！"一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶"这一点我也觉得对，但是我在网上查了一下OHPak SB-805 HQ 的排阻限是400万，OHPak SB-804 HQ 的排阻限是100万，OHPak SB-803 HQ 的排阻限是10万，而我的对照品中最大分子量为200万，现在是以上三根柱子按进样器-805-804-803-2414检测器的顺序串联，这样可以吗？
我问了一下waters 的工程师，她的回答是：这样是可以的，令我不解。望各位大虾解答我的疑惑，谢谢！

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2010/10/18 18:50:21 Last edit by penglei_08