15 改变色谱柱直径对
液相色谱分析有什么影响?
如果色谱柱直径减半,则灵敏性增加四到五倍(假设进样量不变)。例如,等量的样品进样到内径为 2.1mm 的色谱柱比进样到内径为 4.6mm 的色谱柱所生成的峰高 5 倍左右。 只要线性流动保持不变,则柱效率、理论塔板数、反压和分析时间等参数均与色谱柱内径的减小无关。
16 改变填料颗粒大小和色谱柱的长度对
液相色谱分离有什么影响?
如果填料颗粒大小减半,则理论塔板数加倍(假设柱长不变)。如果填料颗粒大小减半,则柱压增加为原来的四倍。 如果柱长加倍,则理论塔板数加倍。如果柱长加倍,则分析时间加倍。随着柱长增加,柱压也线性地增加。 以下是一个根据上述信息选择色谱柱的示例: 一个装填 10um 填料的长度为 200mm 的色谱柱可生成 6000 块理论塔板,这是在很多情况下能提供比较适当的分离的色谱柱效率。将颗粒大小由 10um 减小到 5um,柱长仍为 200mm,则可生成 12000 块理论塔板。然而,这个色谱柱可生成相当于原来四倍的柱压。通常情况下不需要生成 12000 块塔板,因此柱长可减半至 100mm,结果生成 6000 块塔板,同时分析时间也缩短一半;柱压仅比最初装填 10um 填料的长度为 200mm 的色谱柱高两倍。
17 能否提供一种与我使用的LC 色谱柱相同的色谱柱?
即使用同一种固定相,不同厂商的
液相色谱柱也可能具有不同的保留时间。 虽然这里提供了一些不同厂商的色谱柱的参考数据,但这些数据在不同的色谱条件下会有所不同。我们通常根据您的应用情况,向您推荐一种其它的色谱柱。在此之前,我们需要您提供以下信息: 样品的详细信息(样品的成分和要分析的成分); 是否可以接受
液相色谱条件的改变; 能否对您的方法进行一些调整。 如果您不能接受分析条件和/或保留时间的改变,则应该继续使用目前的色谱柱。