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主题：【分享】一个难溶的蛋白质

浏览0 回复2 电梯直达
tianru的爸爸
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发表于：2010/11/05 12:22:56 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近在做一个蛋白质的纯化，实在是太难溶了。
包涵体表达的，用8M尿素溶解都只能溶解到1-2mg/ml，去掉尿素用其它去污剂（Triton，Tween）就析出，实在太费劲了。

又不能用SDS，这个实在太难去除了，因为它（SDS）会影响后续实验。

等我把它真正溶解后再说说用的是什么溶剂配方。

如果大家也有类似的经历，可以一起来分享分享。
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gl19860312
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2010/11/6 18:31:18 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你可以 下载 一下包涵体相关的 论文

参考他人的劳动成果 学习一下 O(∩_∩)O哈！
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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2010/11/8 15:53:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天用ph5.0的buffer上SP柱，ph6.4和7.4的清洗，精氨酸洗脱。
基本缓冲液成分：10%甘油、5mM EDTA、0.5%Triton X-100、5mM DTT。

现在正在电泳，结果明天出来。
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