主题：【仪器参数解读（三）】第三集：紫外-可见分光光度计参数全解析

ghcily回复于2010/12/05

光源：氘灯，溴钨灯

蓝精灵回复于2010/12/05

想知道对于氘灯，流动相以色谱纯甲醇或乙腈记，参比光能低于多少算能量低了？

tarika回复于2011/01/05

1.不同的波长范围对实验有影响吗？对仪器本身的技术要求高吗？
    好像主要取决于检测器，通常光电倍增管的只能到900nm，硅光电池和二极管可以到1100nm。估计光电倍增管要比硅光电池贵很多，因为双光束到1100nm的紫外都有两个检测器，而双光束到900nm的都是用斩光镜的。虽然波长下限一般都是190nm，但也有很少紫外能到165nm，但需要特殊的检测器和整个光路系统的吹扫（去除氧气）

2.光谱宽度大或小怎么影响实验数据啊？
    这个是分辨率和灵敏度的权衡，也是以前困扰我很久的问题，和大家分享一个实验——苯蒸汽的五指峰，非常简单，但对于回答这个问题很直观。大家可以在带盖比色皿里装一点苯，然后选择不同的带宽做230-280nm的扫描。5nm带宽看到的应该是一个馒头峰，逐渐降低到1nm时就能看到五个峰了，好像0.5nm带宽还有六个。这样可以看出减小带宽能够提高分辨率。不过带宽减小时透过的光能量也降低了，灵敏度就会下降，所以分辨率与灵敏度总有一个平衡点

3.波长准确度和精确度是一回事吗？有什么区别？
      精确度应该包含了精密度和准确度吧，一个是重现性，一个是准确性

4.波长重复性是不是越小越好啊？你怎么理解的？
        可能是越小越好吧？不过够用就行

5.基线平直度是代表的什么？你理解吗？
      大概就是表征噪音吧？没太关注

6.光度范围的意思是什么？怎么影响我们的实验数据呢？
      我觉得这个光度范围应该是指仪器可以测量的吸光度上限。能显示到多少是厂家软件设置的，但是真正能做到多少是和杂散光相关的，杂散光越低的仪器，上限就越高。因为郎伯比尔定律的前提是单色光，仪器无法得到真正的单色光，浓度高、杂散光大，测得的吸光度值误差就大（标准曲线会向横坐标弯）。所以对于杂散光比较大的仪器，测定吸光度值高会有很大的误差

gongwenbin回复于2010/12/06

紫外可见分光光度计就是指光谱范围在紫外区和可见区的分光光度计，一般波长范围在190-1100或190-900nm。