实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8042673今日发帖：530 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
食品毒素/微生物检测
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】无菌实验，环氧乙烷

浏览0 回复9 电梯直达
wudihsw123
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2011/02/25 09:14:11 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
产品初始污染菌的操作步骤
无菌实验（需厌氧菌、霉菌）的操作步骤
生物指示剂菌片的操作步骤及记录表格
环氧乙烷残留量的操作步骤及计算公式
该帖子作者被版主 牛牛加 3积分， 2经验，加分理由：欢迎常来微生物！
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:03:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
初始污染菌检测也就是一个微生物的限度试验,指的非规定灭菌制品及原材料,辅料及成品在灭菌前受到微生物污染程度的一种检查方法,包括的染菌量及控制菌的检查,也就是通常的菌落计数,大肠菌群及致病菌检查.
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:08:29 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
初始菌检测项目：
大肠菌群、霉菌酵母菌、溶血性链球菌、沙门氏菌、志贺氏、金黄色葡萄球菌
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:09:53 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
具体操作方法可参照以下标准
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100424/2519049/
GB 4789.15-2010 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100424/2519039/
GB 4789.2-2010 食品微生物学检验 菌落总数
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:15:29 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100424/2519048/
GB 4789.10-2010 食品微生物学检验 金黄色葡萄球


http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100424/2519045/
GB 4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100424/2519043/

GB 4789.3-2010 食品微生物学检验 大肠菌群计数
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:18:40 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
http://www.instrument.com.cn/download/shtml/025839.shtml
可参考上面资料
《消毒技术规范》2002版 2.1.11 一次性使用卫生用品鉴定试验
                      2.1.11.2.1细菌菌落总数与初始污染菌检测法

赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:20:06 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、        目的
检测清洗包装后的产品初始污染菌是否符合要求
2、适用范围
适用于需灭菌产品清洗、包装后的检验
3、        检验依据
EN1174-1996医疗器械灭菌产品中微生物数量的评估
GB14233。2-1993医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分：生物试验方法
GB15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准
GB7918。2-1987化妆品微生物标准检测方法：细菌总数测定
4、        仪器、设备
细菌培养箱、洁净工作台、电子天平、PH计、压力蒸汽灭菌器、4。C冰箱。酒精灯、3000ml的三角烧瓶，无菌棉签，无菌镊子，试管架，9mm细菌养皿，放大镜。
5、        检验方法
5．1普通肉汤琼脂培养基的制备
5．1．1所用试剂
胨10g
氯化钠5g
琼脂15-20g
肉浸液1000ml
5．1．2制备
取牛肉浸膏3 g加水1000 ml，配成肉浸液。将胨、氯化钠、琼脂加入肉浸液中，加热溶解，调节PH为7。2，置入压力蒸汽灭菌器内，灭菌后于超净工作台内装在9 mm的细菌培养皿中（15-20ml/每个平皿），于4。C保存备用。
5．2抽样
从每个清洗批次的产品中随机抽样。同一批次产品数<50件，抽取3件；同一批次产品数为50~100件，抽取5件；同一批次产品数>100件，抽取10件。
5．3取样
于微生物实验室超净工作台内，将浸有无菌生理盐水的无菌棉签在检品的外表面依次擦拭，然后用无菌镊子将棉签上的棉球取下，放入含有1ml无菌生理盐水试管内振摇数次，静止5分钟，即获得擦拭棉球浸提液；以同样的方法擦拭检品内表面。获取检品内表面擦拭棉球浸提液。
5．4接种
将上述检品内、外表面擦拭棉球浸提液倒入普通肉汤琼脂平板，水平旋摇使之均匀布在培养皿表面，在超净止放置至培养皿表面浸液十后进入下一步操作。
5．5培养
接种后的培养皿倒置于细菌培养箱中，以未接种肉汤琼脂培养基为阴性对照，以金黄色葡萄球菌（北京生物制品检定所）作阳对照，37。C培养48暗时后观察结果。
5．6结果判定
依据GB15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准，管状类灭菌产品表面初始污染菌<10cfu/件次为合格，否则不合格。并将判定结果填入记录表中。
6、        质量记录
7、        6。1SD015-01《初始污染菌检验记录》
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:20:46 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
产品无菌检验
1、        目的
通过对灭菌后产品无菌检测，以确保灭菌后产品能够达到无菌的要求
2、        适用范围
适用于灭菌后产品的无菌检验
3、        检验依据
EN1174-1996医疗器械灭菌产品中微生物数量的评估
GB14233。2-1993医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分：生物试验方法
GB15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准
4、        仪器、设备
细菌培养箱、霉菌培养箱、操净工作台、电子天平、PH计、压力蒸汽灭菌器、4。C冰箱。酒精灯、3000ml的三角烧瓶，无菌棉签、列菌镊子，试管架，大试管若干，放大镜。
5、        检验方法
5．1需气菌、厌气菌培养基的制备
5．1．1所用试剂
酪胨（酪蛋白胨）15g
葡萄糖5g
L-胱氨酸0。5g
酵母浸出粉5g
新鲜配制的0。1%刃天青溶液1。0ml
琼脂0。5-0。7g
水1000ml
5．1．2制备
除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分加入800 ml水，加热溶解，摇匀，调节PH为7。1+-0。2，加入葡萄糖和刃天青溶液，加水至1000 ml，分装后置入压力蒸汽灭菌器内，灭菌后于4。C保存备用。
5．2霉菌培养基的制备
5．2．1所用试剂
胨5g
葡萄糖10g
磷酸二氢钾（KH2PO4）1。0g
硫酸镁（MGSO4。7H2O）0。5g
水1000 ml
5.2.2制备
取上述成分除葡萄糖外，加入约800 ml水，加热溶解后，加葡萄糖溶解摇匀，调节PH为6。0，加水至1000 ml，分装后置入压力蒸汽灭菌器内，灭菌后4。C保存备用。
5．3抽样
每个灭菌批次在灭菌柜内放置菌片，灭菌后检验菌片
5．4菌片贮存
灭菌前、后菌片应按菌片说明书规定条件保存。（REVEN公司菌贮存温度为15~27。C）
5．5接种
于洁净工作台内，分别将灭菌后菌片成对放入需气菌、厌气菌培养基霉菌培养基，进入下一步操作。
5．6培养
需气、厌气菌培养以金黄色葡萄球菌（北京药品检定所产品）作阳性对照，以未接种的需气菌、厌气菌培养春为阴性对照，于细菌培养箱培养37。C48小时后观察结果
霉菌培养以白色念珠菌（中国药品生物制品检定所）作阳性对照，以未接种的霉菌培养基作为阴性对照，于霉菌培养箱培养25。C48小时后观察结果
5．7结果判定
除阳性对照外，经7天培养后，阴性对照和被检样品仍未见需气菌、厌气菌和霉菌生长为合格，将判定结果记录表中。
6、        质量记录
6．1SD014-01《灭菌产品无菌检验记录》
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
去年冬天
7336167
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 10:24:33 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
环氧乙烷残留量
1、        目的
检验清洗包装、灭菌后的最终产品的环氧乙烷（EO）残留量是否符合要求
2、        适用范围
适用于灭菌后最终产品的检验。
3、        检验依据
ISO10993-7：1995（E）医疗器械产品的生物学评价第七部分：环氧乙烷灭菌残留量
4、        仪器、设备
气相色谱仪（氢焰检测器）FID，分析天平，容量瓶：50ml、10ml，刻度吸量管：5 ml、1 ml、02 ml，手术剪，微量进样器
5、        检验周期
每一灭菌批应检验环氧乙烷残留量
6、        检验方法
6．1待测样品（灭菌后的最终产品）用手术剪剪成小碎块，精密称取1g放入10 ml容量瓶中,加入去离子水至刻度,盖塞,室温密封保存24小时,待检测
6.2标准溶液的配置
将事先加入约40 ml去离子水盖塞的50 ml容量瓶在分析天平上称重,用清洁滴管迅速吸取液态EO,滴3-4滴于上述准确称重好的50ml容量瓶中,轻摇,盖塞瓶在分析天平上称重(两次称重差即为EO重量),加去离子水至刻度,摇匀即为浓溶液.将此溶液稀释成100mg/ml作为标准贮备液.用此标准贮备液配置成0.4,0.5,1.2.5.10mg/ml等系列浓度溶液,留待检测
6.3检验过程
6.3.1通入载气,调节载气路稳流阀,将压力表指示稳定在0.4MPA:打开电源开关,设定参数,柱温:120.C,注样器:200.C:检测器:230.C:待仪器温度稳定后,杨形象高纯氢气发生器和低噪声净化空气源的开关,调节相应气体流量控制阀,设定氢气为30ml/min,空气为150ml/min,左右;用电子点火枪沿检测器气体气放空口进行点火,点燃后,将空气调节到300 ml/min,
6.3.2打开计算机中的N2000在线工作站,设置好采样和积分参数(面积外标法),查看基线,等基线稳定后,取2ml去离子水进行色谱分析,保存谱图文件;
5.3.3各取上述配置好的标准溶液2ml进行色谱分析,每种浓度重复测试3次左右,保存谱图文件以供分析.
6.3.4取制备好的待测试样溶液2ml进行色谱分析,重复测试3次左右,保存谱文件.
5.3.5打开N2000离线工作站,用测试得到的标准溶液的谱图文件绘制校正曲线,保存方法文件;打开待测试样的谱图文件,加载上述方法文件,计算出环氧乙烷残留量.
6.3.6若样品中的环氧乙烷残留量<10mg/g,则样品为合格,否则为不合格,并将检测和判定结果填入记录表中.
7,质量记录
SD016-01<环氧乙烷残留量检验记录>
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
2011/2/26 10:24:50 Last edit by 7336167
wudihsw123
wudihsw123
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/2/26 15:47:44 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢你们了
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】无菌实验，环氧乙烷
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁