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液相色谱进行分析时,即使装置无故障,有时也会无法做出准确的分析。分析前作好检查工作,可防患于未然。为此,将平时须留意的事项,做简要介绍。
一、启动前的检查
1
流动相的置备要与装置相适应
流动相必须经过过滤:在送液泵内,为了防止杂质和颗粒进入流路,要装有0.45μm的吸滤器,否则会导致流路和污染,使仪器工作不正常。
1)
流动相恢复到室温后使用:流动相温度与室温相差时,容易产生气泡。导致仪器基线很难稳定,特别是发生漂移,使流动相要恢复到室温后再使用。
2)
流动相务必进行脱气:使用
液相色谱仪时遇到的最大麻烦就是流动相产生气泡,这会引起泵输液不畅和检测器产生噪声和漂移。
3)
检查溶剂瓶内吸滤器是否堵塞:溶剂的质量或微生物的生长会堵塞吸滤器,从而影响
液相色谱系统的正常运行。有效防止吸滤器堵塞的有效方法:a.若需使用含盐的流动相,使用前务必过滤;b.流动相若为蒸馏水或含盐的缓冲液,建议现用现配;c.尽量避免溶剂瓶在阳光下暴晒。吸滤器堵塞后的处理方法:a.取下吸滤器滤头放在(1:4,V/V)硝酸溶液烧杯中超声清洗15min;b.取出后用蒸馏水超声清洗10min;c.用吸耳球吹出过滤头中的液体;d.再换蒸馏水超声清洗10min;e.用吸耳球吹出过滤头中的水分;将吸滤器滤头重新放入熔剂瓶中(正相系统注意将吸滤器滤头烘干在使用)。
4)
更换流动相时应注意事项:
a)
更换有互溶性的流动相时:a.将吸滤器部分放入准备更换流动相的烧杯中边振动边清洗,更换烧杯中的流动相直至清洗干净;b.打开排液阀,按清洗键清洗泵中的流动相;c.然后将吸滤器部分再放入流动相瓶内,关闭排液阀,在较短时间内清洗流路;d.最后连接柱和检测器,清洗整个分析流路。
b)
更换无互溶性的流动相时:准备与新旧流动相具有互溶性的中间清洗液,首先换成中间清洗液,然后再把中间清洗液换成新的流动相.每次更换顺序都要遵循前诉的a~d的顺序。
c)
更换缓冲液的流动相时:在新旧流动相的任一方或双方使用缓冲液时,准备蒸馏水做中间清洗液,首先用蒸馏水置换整个流路,然后更换成新的流动相,这是防止缓冲液中的盐析出。