主题:【求助】想购买色谱柱,可不知道买什么的好

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zlzlp2009
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最近想测小麦中的物质,主要是酚类化合物和生物碱类,由于其含量较少,需要HPLC来测量,之前没做过,故需要购买柱子。柱子也没买过,想咨询下各位大侠我该买啥柱子,哪个品牌柱子比较好,只要质量好,钱不是问题。
推荐答案:去年冬天回复于2011/03/11
方法名称:
     北草乌--生物碱含量测定--HPLC法
应用范围:
     确定其主要生物碱含量,以供用药参考
方法原理:
     北草乌根粉分别以不同溶剂,采用不同提取方法进行提取,提取液经液相色谱分离,在235nm处测定峰面积,外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
    

仪器设备  日本岛津公司LC-10A 液相色谱仪带SPD-M10A 二极管阵列紫外检测器和CLASS-LC10 工作站;ZFQ-5旋转蒸发仪(天津玻璃仪器厂);8893E-MT 超声波清洗器(美国Coli-Parmer)

色谱条件  ODS柱(25mm×4.6mm),流动相:甲醇-水-乙腈(67:33:2),内含6mmol/lSDS,0.02mol/lNaH2PO4),流速:1.0ml/min,检测波长:235 nm
试样制备:
    

对照品溶液的配制  准确称取新乌头碱3.0mg,次乌头碱2.7mg,乌头碱2.4mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得.

供试品溶液的配制  分别取8份过6 目标准筛的北草乌根粉各200g盛于2500ml的细口瓶中,四份用于溶剂浸提,4份用于溶剂超声辅助浸提。分别加10%氨水300ml,放置2h充分浸润,然后分别两两加入1000ml苯、氯仿、乙醇、乙醚作为浸提溶剂,溶剂浸提时间为12h,每隔1h用力振摇,使分散均匀,当进行6h后,倾出溶剂,重新补加1000ml溶剂;超声辅助浸提两次,每次各 1h,并不时用力振摇,当进行1h后,倾出溶剂,补加另1000 ml 溶剂,继续超声辅助浸提,浸提结束后,过滤,于旋转蒸发器上将溶液浓缩,回收溶剂,用2%的盐酸萃取4次,合并萃取液,加浓氨水调pH值至9,产生白色絮状沉淀,静止过滤后,干燥恒重得乌头生物碱.。取总乌头碱10.8mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得。
操作步骤:
     分别精密吸取试品溶液10μl,按上述色谱条件测定,外标定量法计算样品中北草乌生物碱的含量。
补充答案:

wsy18回复于2011/03/11

上海月旭的柱子还不错,可以到月旭版面看看,请他们帮你推荐下,或许还可以请他们帮你做个试验。
月旭版面的链接:http://bbs.instrument.com.cn/forum_595.htm

hu_2104411回复于2011/03/11

好柱子多了,看你自己方法用哪种,你们没有旧柱子吗,可以先试试。我液相只用W的,从symmetry到Xterra到Xbridge,相当好,特别粒度5u的,柱压低,柱效也高

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楼主可参考上面资料。
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     北草乌--生物碱含量测定--HPLC法
应用范围:
     确定其主要生物碱含量,以供用药参考
方法原理:
     北草乌根粉分别以不同溶剂,采用不同提取方法进行提取,提取液经液相色谱分离,在235nm处测定峰面积,外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
    

仪器设备  日本岛津公司LC-10A 液相色谱仪带SPD-M10A 二极管阵列紫外检测器和CLASS-LC10 工作站;ZFQ-5旋转蒸发仪(天津玻璃仪器厂);8893E-MT 超声波清洗器(美国Coli-Parmer)

色谱条件  ODS柱(25mm×4.6mm),流动相:甲醇-水-乙腈(67:33:2),内含6mmol/lSDS,0.02mol/lNaH2PO4),流速:1.0ml/min,检测波长:235 nm
试样制备:
    

对照品溶液的配制  准确称取新乌头碱3.0mg,次乌头碱2.7mg,乌头碱2.4mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得.

供试品溶液的配制  分别取8份过6 目标准筛的北草乌根粉各200g盛于2500ml的细口瓶中,四份用于溶剂浸提,4份用于溶剂超声辅助浸提。分别加10%氨水300ml,放置2h充分浸润,然后分别两两加入1000ml苯、氯仿、乙醇、乙醚作为浸提溶剂,溶剂浸提时间为12h,每隔1h用力振摇,使分散均匀,当进行6h后,倾出溶剂,重新补加1000ml溶剂;超声辅助浸提两次,每次各 1h,并不时用力振摇,当进行1h后,倾出溶剂,补加另1000 ml 溶剂,继续超声辅助浸提,浸提结束后,过滤,于旋转蒸发器上将溶液浓缩,回收溶剂,用2%的盐酸萃取4次,合并萃取液,加浓氨水调pH值至9,产生白色絮状沉淀,静止过滤后,干燥恒重得乌头生物碱.。取总乌头碱10.8mg,用流动相溶液溶解后并移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得。
操作步骤:
     分别精密吸取试品溶液10μl,按上述色谱条件测定,外标定量法计算样品中北草乌生物碱的含量。
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上海月旭的柱子还不错,可以到月旭版面看看,请他们帮你推荐下,或许还可以请他们帮你做个试验。
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好柱子多了,看你自己方法用哪种,你们没有旧柱子吗,可以先试试。我液相只用W的,从symmetry到Xterra到Xbridge,相当好,特别粒度5u的,柱压低,柱效也高
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原文由 去年冬天(7336167) 发表:
以Hypsil C18(4。6 mm×250 mm,5μm)为固定相,


Hypsil C18(4。6 mm×250 mm,5μm)这是柱子的型号吗,250mm与150mm的柱子有区别嘛,分离物质时的保留时间差异很大吗?
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原文由 daqingfanren(daqingfanren) 发表:
安捷伦的都不错,我们都在用。

问下 买安捷伦的柱子可以让其帮忙进样不,看下效果好不,要不不是白买啦!
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原文由 hu_2104411(hu_2104411) 发表:
好柱子多了,看你自己方法用哪种,你们没有旧柱子吗,可以先试试。我液相只用W的,从symmetry到Xterra到Xbridge,相当好,特别粒度5u的,柱压低,柱效也高

有一个柱子,好像是安捷伦的,但是效果分离的不好,所以想买个新柱子。
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