主题:【已应助】【求助】uplc-ms-ms 进行多肽定性分析

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catty125699
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最近在用uplc-三重四极杆质谱(waters TQD)分析多肽样品分子量,分子量从900-6000不等,生产中间体

谱蠕动泵进样,纯水0.1%甲酸溶解,一级质谱全扫描:
1有时没有目标分子峰出现(一级锥孔电压50并不大)这个问题实在令人费解
2分子量2000以上应带多电荷,但很少见2+的峰出现,而我们有时候很需要这个峰定性
请问一般做多肽一级质谱都用什么试剂溶解,加何种酸才能使信号响应良好

有做过多肽样品质谱分析的前辈请指教,非常感谢
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maldiguy
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分子量2000以上基本上是3价的
是不是样品里面盐比较多?一般直接进样应该很好出峰的
catty125699
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原文由 maldiguy(maldiguy) 发表:
分子量2000以上基本上是3价的
是不是样品里面盐比较多?一般直接进样应该很好出峰的

样品里应该没有盐的,不过是有其他小的杂肽
nike123
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蓝精灵
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以前有做过小肽,貌似对样品溶剂和流动相溶剂的pH要求较高,楼主可以试一试
catty125699
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原文由 蓝精灵(xuxue_19861016) 发表:
以前有做过小肽,貌似对样品溶剂和流动相溶剂的pH要求较高,楼主可以试一试


好的,谢谢提醒
tanggangfeng
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直接进样,一般在样品直接加甲酸比较的多。
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2011/3/26 21:02:29 Last edit by tanggangfeng
catty125699
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感谢各位的帮助,现在这个问题已经解决了,找工程师清洗了仪器,从新做了校正
junjun203
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vnaren
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1。直接进样建议还是使用含50%有机溶剂的流动相利于离子化
2。2000的肽可以看一下+3的离子
3。不知道你样品是混合物还是纯品,建议有条件还是经过柱子分离后LCMS分析效果比较好
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