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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】CE 重现性太差

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work037
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发表于：2011/04/25 20:37:56 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近在学用CE，分离中性的样品，为了带上电荷，把pH调到12，分离不错，但第二针就完了，电流值不断下降，峰面积不断减少，峰位不断提前。开始以为是管路的问题，洗了也没用。后来觉得是缓冲容量是不是小了，但加大盐浓度后，分离缺更差，有没有好办法呀。
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2011/4/26 0:24:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 work037(work037) 发表:
最近在学用CE，分离中性的样品，为了带上电荷，把pH调到12，分离不错，但第二针就完了，电流值不断下降，峰面积不断减少，峰位不断提前。开始以为是管路的问题，洗了也没用。后来觉得是缓冲容量是不是小了，但加大盐浓度后，分离缺更差，有没有好办法呀。


电流下降就是有问题了。
你最好重新换一根毛细管，毛细管的预处理做的充分些。甲醇、水、HCl、NaOH（30min）。
样品浓度低一些（防止吸附）
样品与样品中间用甲醇洗0.5min
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2011/4/26 9:18:16 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
中性样品,为何要用那么高的pH,高pH应该是带负电荷阿,建议选择低pH试一下. 另外,我很少见到用到pH 12 的缓冲体系.
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ericwong
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2011/4/29 9:25:15 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主的问题解决了吗？是哪里出了问题？
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work037
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2011/4/29 20:03:42 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有不和CE玩了。。。。
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kylabs
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2011/4/29 22:52:17 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
操作不规范，所以很多不重现。
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