主题:【已应助】【求助】做MRM时出现杂峰...(附图)求解!3Q!

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lskane
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原文由 蓝精灵(xuxue_19861016) 发表:
1,不知道楼主样品基质是什么?是水解液直接进样吗?
2,楼主如果给出的图均为MRM,那么有理由推测楼主的蛋白质水解下的不仅仅是两种氨基酸,可能还有含该氨基酸的二肽或多肽,因此对该两种氨基酸的通道形成干扰
3,建议楼主可以做以下两个尝试:优化蛋白质水解条件;以该MRM液相洗脱条件为依据,调节梯度洗脱程序,使其他水解物的干扰峰与目标化合物的峰分离。


非常感谢,但是我觉得二肽或者小肽可能色谱行为不一样,但是如果二肽进了质谱的话 应该不会被扫进去的吧 毕竟质量数和母离子差太多了。如果在源内裂成目标氨基酸了的话 那应该两个子离子都出现 而不是图上那样只出一个碎片 另一个没有。我做无机元素比较多 有机这块不是很熟 还请多指教哈哈
lskane
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原文由 georgeding(georgeding) 发表:
原文由 lskane(lskane) 发表:
最近用LC-ESI-MS/MS测蛋白水解后的两种氨基酸,结果在保留时间外出现很多碎片峰 求解~~~ 上图片 干净的是标样 另一个是样品的 前一组分在1.8min出峰 后一个在3.8min出峰 其余都是杂峰


楼主,根据你的图谱,有这几点可能性:
1、样品前处理问题。样品处理不干净,本底很高,建议用一级质谱和相应的MRM方法来对空白生物样品进行扫描。可以窥见端倪。
2、基质干扰,建议改变色谱方法和质谱方法,如将等比例变为梯度,将质谱的定性和定量离子交换试一下,看本地是否降低。


已经是梯度了 应该是样品基质的问题吧 可能酶解液太.....
lskane
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原文由 georgeding(georgeding) 发表:
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最近用LC-ESI-MS/MS测蛋白水解后的两种氨基酸,结果在保留时间外出现很多碎片峰 求解~~~ 上图片 干净的是标样 另一个是样品的 前一组分在1.8min出峰 后一个在3.8min出峰 其余都是杂峰


楼主,根据你的图谱,有这几点可能性:
1、样品前处理问题。样品处理不干净,本底很高,建议用一级质谱和相应的MRM方法来对空白生物样品进行扫描。可以窥见端倪。
2、基质干扰,建议改变色谱方法和质谱方法,如将等比例变为梯度,将质谱的定性和定量离子交换试一下,看本地是否降低。


主要是跟酶解不彻底没关系就OK 但是对定性分析准确性有影响吗?
lskane
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原文由 胜邪(nankingee) 发表:
原文由 lskane(lskane) 发表:
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一方面,可能和样品制备有关,即基质干扰。
另一方面,可以验证一下分析方法,即方法开发有没有问题。


头像很给力哈哈
如果是基质干扰是在质量分离器这个环节吗?不然不会被选作母离子并进一步打碎的吧
还有你说的第二点有点不明白哈 会影响吗?


换个采集的离子对试试。


样品没了....
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