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主题：【求助】请教一个添加内标物的特殊情况

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clearaholic
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发表于：2011/07/12 10:31:49 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我看到有人说添加内标物是要保证向标准溶液和样品溶液中添加相同量的内标物；有人说添加内标物时要保证（加入内标物和标准溶液的体积比）要和（加入内标物与样品溶液的体积比一致）。

比如，如果准备一系列200 ul的标准溶液，加入20 ul内标物；那么也要向200 ul样品溶液中加入20 ul的内标物。

我的困惑是如果我的样品量和标准溶液体积不同时怎么办呢？因为我要比较一下不同样品量对结果的影响，具体来说：

我打算首先配制一系列200 ul的标准溶液，加入20 ul内标物，然后进样（标准溶液和内标物体积比为10:1）；

问题是如果我的样品量是100 ul时，应该加入多少内标物呢？是加入20 ul，以保证和标准溶液中相同的内标量呢？还是加入10 ul，以保证样品体积量和内标物体积比为10:1呢？

同样，如果我的样品量是50 ul是，是加入20 ul内标呢，还是加入5 ul内标物呢？

谢谢指教。
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2011/7/12 12:41:45 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
通常情况下对照品和样品所加内标物浓度基本一致，以减少误差！
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2011/7/12 15:30:58 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
内标物的量要和样品的量接近，这样可以减少误差。加多少看你样品的量
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2011/7/12 21:21:16 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:
通常情况下对照品和样品所加内标物浓度基本一致，以减少误差！


谢谢指点，那么你所谓的浓度基本一致是什么意思？

具体到我的例子，如果对照片和样品的体积不同，怎么保证浓度基本一致呢？

比如我的对照片体积为200 ul，加入20 ul内标；
那么我的样品如果是100 ul，是不是应该加入10 ul同样的内标呢？

谢谢
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活到九十 学到一百
wangboxzzjs
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2011/7/14 10:43:16 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该按比例减少，最终应该保证内标物的浓度是一致的，而不是加入的量。
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clearaholic
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2011/7/14 12:25:40 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 活到九十  学到一百(wangboxzzjs) 发表:
应该按比例减少，最终应该保证内标物的浓度是一致的，而不是加入的量。


就是说如果样品是100 ul，就应该加10 ul内标；如果样品是50 ul，就应该加入5 ul，对吗？或者说，要保证加入内标时，样品体积与内标体积比要跟标准与内标体积比保持一致，这样保证二者浓度成比例变化。只考虑加入时的比例，不用管中间处理，因为二者理论上是应该变化一致的。

我也是这么理解的，也这么实际操作了一下，结果发现跟用外标法测得的结果差两到三倍。而且我的50 ul样品量和100  ul样品量测得的结果也差很多。我考虑是不是有可能我选用的内标不合适？

谢谢指教
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